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基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨晚蚕沙提取物对糖尿病胃轻瘫大鼠cajal间质细胞的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：张惠贞张红李伟赵凯邱雨迪北京中医药大学第三临床医学院北京中医药大学房山医院

目的：基于磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路探讨晚蚕沙提取物对糖尿病胃轻瘫(Diabetic Gastroparesis，DGP)大鼠治疗作用机制。方法：制备DGP大鼠模型，随机分为空白组、模型组、莫沙必利组(0.15 g·... 详细信息

目的：基于磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路探讨晚蚕沙提取物对糖尿病胃轻瘫(Diabetic Gastroparesis，DGP)大鼠治疗作用机制。方法：制备DGP大鼠模型，随机分为空白组、模型组、莫沙必利组(0.15 g·mL-1的枸橼酸莫沙必利混悬液)以及晚蚕沙提取物高、中、低剂量组(3.2、1.6、0.8 g·kg-1)，灌胃4周。检测大鼠胃排空率、随机血糖，HE染色观察胃窦部形态变化，免疫组化分析c-Kit基因表达，TUNEL染色观察cajal间质细胞凋亡，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、mTOR及p-mTOR的蛋白表达。结果：与空白组比较，模型组胃排空率大幅降低(P<0.01)，胃窦部腺体结构破坏，c-Kit表达减少(P<0.01)，ICC凋亡增加；与模型组比较，晚蚕沙提取物高、中、低剂量组及莫沙必利组胃排空率均显著升高(P<0.01)，胃窦腺体结构逐渐紧密，ICC凋亡减少，其中晚蚕沙提取物高剂量组c-Kit表达明显升高(P<0.05)。经Western blot检测，与空白组比较，模型组p-Akt/Akt、p-PI3K/PI3K及p-mTOR/mTOR蛋白表达均升高(P<0.01)。与模型组比，晚蚕沙提取物高剂量组p-Akt/Akt蛋白表达降低(P<0.01)；晚蚕沙提取物中剂量组、低剂量组及莫沙必利组p-PI3K/PI3K蛋白表达降低(P<0.01，P<0.05)；晚蚕沙提取物低剂量组p-mTOR/mTOR蛋白表达降低(P<0.05)。在随机血糖方面，与空白组相比，模型组随机血糖明显升高(P<0.01)；与模型组比，晚蚕沙提取物高、中剂量组随机血糖明显降低(P<0.05)。与莫沙必利组比较，晚蚕沙提取物高剂量组p-Akt/Akt蛋白表达降低(P<0.05)，晚蚕沙提取物高、中、低剂量组p-PI3K/PI3K蛋白表达升高(P<0.05，P<0.01)。结论：晚蚕沙提取物可提高DGP大鼠胃排空率、减轻ICC的凋亡，同时降低随机血糖，其中晚蚕沙提取物高剂量组抑制ICC凋亡疗效显著，其作用机制可能与调控PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。

关键词：糖尿病胃轻瘫晚蚕沙提取物 cajal间质细胞 PI3K/Akt/mTOR信号通路

cajal间质细胞与慢传输型便秘的相关机制研究进展

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中国医刊 2024年第7期59卷 720-723页

作者：舒磊蔡志阳刘曜安张春霞金黑鹰南京中医药大学第二附属医院(江苏省第二中医院) 江苏南京210017

随着生活方式的改变,慢传输型便秘(STC)发病率不断上升,已经成为严重影响人们生活健康的因素之一,引起了广泛关注。STC的发病机制目前尚不明确,但研究发现其与cajal间质细胞(ICC)密切相关。本文就ICC与肠神经递质、肠道菌群、ICC自噬、... 详细信息

随着生活方式的改变,慢传输型便秘(STC)发病率不断上升,已经成为严重影响人们生活健康的因素之一,引起了广泛关注。STC的发病机制目前尚不明确,但研究发现其与cajal间质细胞(ICC)密切相关。本文就ICC与肠神经递质、肠道菌群、ICC自噬、水通道蛋白之间的联系及对STC的影响进行综述,旨在为今后STC的研究提供帮助。

关键词： cajal间质细胞慢传输型便秘神经递质肠道菌群自噬

中医药调节cajal间质细胞治疗慢传输型便秘的研究进展

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江西中医药 2024年第7期55卷 70-75页

作者：李欣钰张志明宋忠阳张录梅刘叶元沈雁云张茂福甘肃中医药大学兰州730000 甘肃省中医院兰州730050 甘肃中医药大学附属医院兰州730090

慢传输型便秘(STC)是功能性便秘的一种类型,其症状特点为结肠动力减弱,消化系统的运转受阻,使得患者的消化过程变得缓慢而不易恢复。随着cajal间质细胞在STC发病机理上的深入探索,两者的关系已经得到了学术界的广泛关注。近年来,cajal... 详细信息

慢传输型便秘(STC)是功能性便秘的一种类型,其症状特点为结肠动力减弱,消化系统的运转受阻,使得患者的消化过程变得缓慢而不易恢复。随着cajal间质细胞在STC发病机理上的深入探索,两者的关系已经得到了学术界的广泛关注。近年来,cajal间质细胞和STC之间的关系也受到了越来越多重视,这也促使临床探索更有效的中医药治疗方案,以期为STC的实验研究提供基础理论依据。

关键词：中医药 cajal间质细胞慢传输型便秘信号通路

舒胃方调控SCF/c-Kit通路对功能性消化不良大鼠胃排空功能及cajal间质细胞的影响

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中国中西医结合消化杂志 2024年第4期32卷 321-327页

作者：任春艳陈月时召平张鹏飞承德市中医院药学部河北承德067000 承德市人民政府机关门诊部中医科

目的探讨舒胃方调控干细胞生长因子(stem cell factor,SCF)/c-Kit通路对功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)大鼠胃排空功能及cajal间质细胞(interstitial cells of cajal,ICCs)的影响并进行分子对接,分析其作用机制。方法32只SD级大鼠,随机取8只为空白组,另外24只通过多因素应激干预法建立FD大鼠模型,随机分为模型组、莫沙比利组及舒胃方组。光学显微镜观察大鼠胃窦组织;酚红法检测大鼠胃排空率;透射电镜观察大鼠ICCs的超微结构;ELISA法检测大鼠腹主动脉SCF含量;Western Blot检测大鼠胃窦组织SCF、c-Kit蛋白的表达;对舒胃方中所含活性成分进行收集与筛选,并对“有效成分-靶点”拓扑分析所得度值较高的有效成分进行分子对接。结果各组大鼠胃壁组织结构完全,胃黏膜上皮完整,胃腺体结构和排列规整,未见明显炎性细胞浸润。空白组大鼠ICCs超微结构清晰,数量多,体积大,呈圆形、梭形,细胞核占比多,细胞质占比少,线粒体、内质网、核糖体多;模型组大鼠ICCs超微结构改变,数量少,体积小,线粒体肿胀或空泡化;莫沙比利组及舒胃方组大鼠ICCs超微结构改善,数量增多,体积变大,形态改善。与空白组比较,模型组大鼠胃排空率、血清SCF含量及胃窦组织SCF、c-Kit蛋白表达下降(P<0.05);与模型组比较,莫沙必利组与舒胃方组大鼠胃排空率、血清SCF含量及胃窦组织SCF、c-Kit蛋白表达增加(P<0.05)。舒胃方中党参的主要活性成分有21个,炒白术的主要活性成分有7个,枳实的主要活性成分有22个,厚朴的主要活性成分有2个。分子对接结果显示,与关键靶点对接较好的成分有党参中的Daturilin,炒白术中的14-acetyl-12-senecioyl-2E,8Z,10E-atractylentriol,枳实中的nobiletin和厚朴中的Eucalyptol,与SCF、c-Kit的结合能分别为-6.44、-6.87、-5.72、-5.66、-4.31、-5.47、-5.69、-6.04。结论舒胃方可能通过多成分、多靶点调控SCF/c-Kit通路,促进FD大鼠胃动力及ICCs增殖,调节胃肠功能。

关键词：分子对接舒胃方 SCF/c-Kit通路功能性消化不良 cajal间质细胞

基于cajal间质细胞治疗慢传输型便秘患者的研究进展

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国际医药卫生导报 2024年第9期30卷 1409-1414页

作者：肖正平李保松张智睿蒋宏滨州医学院附属医院结直肠疝外科滨州256603

慢传输型便秘(slow transit constipation,STC)是功能性便秘的一种常见类型,以结肠蠕动缓慢、肠道内容物排出延迟为特点,常伴有排便次数少、排便困难等症状。研究表明,STC的发生与cajal间质细胞(interstitial cells of cajal,ICCs)的异... 详细信息

慢传输型便秘(slow transit constipation,STC)是功能性便秘的一种常见类型,以结肠蠕动缓慢、肠道内容物排出延迟为特点,常伴有排便次数少、排便困难等症状。研究表明,STC的发生与cajal间质细胞(interstitial cells of cajal,ICCs)的异常改变有关。本文通过总结ICCs的分类、标志物、功能及其与STC的关系发现ICCs的数量和功能异常可影响STC患者的症状。此外,本文还总结了STC的不同治疗措施如微生态制剂、中医药、物理疗法和分子治疗对ICCs的潜在影响,并提供了STC患者治疗的新思路。笔者认为,ICCs可作为STC患者治疗的潜在靶标,未来研究应当关注ICCs在STC发病机制中的作用,开发特异性治疗手段,并评估干细胞疗法和基因疗法等新兴策略在临床中应用的可能性,为STC患者提供新的治疗选择。

关键词：慢传输型便秘 cajal间质细胞治疗综述

近5年中医药调控cajal间质细胞增殖治疗慢性传输型便秘的研究进展

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天津中医药大学学报 2024年第1期43卷 58-63页

作者：时玉洁陈萌辽宁中医药大学沈阳110847 辽宁中医药大学附属第三医院沈阳110001

慢性传输型便秘(STC)是由于肠道蠕动减慢、粪便传输迟缓所致的便秘,主要表现为排便困难、排便次数减少、排便不尽感,同时伴有腹胀、腹痛等症状,是一种较为普遍的便秘类型,其发病机制尚未被完全阐述。cajal间质细胞(ICC)作为消化道传导... 详细信息

慢性传输型便秘(STC)是由于肠道蠕动减慢、粪便传输迟缓所致的便秘,主要表现为排便困难、排便次数减少、排便不尽感,同时伴有腹胀、腹痛等症状,是一种较为普遍的便秘类型,其发病机制尚未被完全阐述。cajal间质细胞(ICC)作为消化道传导慢波信号的基础,与STC密切相关,是近年来研究的热点。ICC的数量、分布、功能、结构的改变均会影响胃肠道运动,其中ICC的减少是引起STC发病的主要原因。中医药通过辨证论治干预与ICC增殖有关的信号通路,调节ICC数目,调控自噬,抗凋亡,促进胃肠道蠕动,缓解便秘症状。文章对实验研究的信号通路与单味中药、中药复方及针灸推拿方面的治疗机制进行综述,以望为临床治疗STC提供思路。

关键词： cajal间质细胞增殖慢性传输型便秘中医药治疗

电针对糖尿病胃轻瘫大鼠胃cajal间质细胞自噬信号通路的影响

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中国病理生理杂志 2023年第4期39卷 639-646页

作者：张天华魏星黎晓宇肖小娟赵莎彤赵东凤钟艳彭艳湖南中医药大学针灸推拿与康复学院湖南长沙410208 湖南中医药大学信息科学与工程学院湖南长沙410208

目的:探讨电针对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦cajal间质细胞自噬信号通路及胃动力的影响。方法:42只SD大鼠随机分为对照组(15只)和建模组(27只)。采用腹腔注射链脲佐菌素联合高脂高糖饮食不规则喂养8周建立糖尿病胃轻瘫模型,将建模成功的大鼠... 详细信息

目的:探讨电针对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦cajal间质细胞自噬信号通路及胃动力的影响。方法:42只SD大鼠随机分为对照组(15只)和建模组(27只)。采用腹腔注射链脲佐菌素联合高脂高糖饮食不规则喂养8周建立糖尿病胃轻瘫模型,将建模成功的大鼠随机分为模型组和电针组,每组12只。电针组采用电针“足三里”“三阴交”“梁门”穴治疗;对照组与模型组不予以任何治疗。干预结束后,检测各组大鼠血糖水平、尿糖水平、胃排空率和小肠推进率;激光共聚焦检测cajal间质细胞自噬流;透射电镜观察cajal间质细胞自噬状态及超微结构;Western blot法检测cajal间质细胞中微管相关蛋白1轻链3(LC3)、p62、磷酯酰肌醇3-激酶(PI3K)、三磷酸磷脂酰肌醇(PIP3)、蛋白激酶B(PKB/AKT)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及磷酸化mTOR(p-mTOR)蛋白表达量。结果:与对照组比较,模型组大鼠胃排空率和小肠推进率显著下降(Pcajal间质细胞内可见1个自噬小体且胞内破损严重;与模型组比较,电针组大鼠胃排空率和小肠推进率显著上升(Pcajal间质细胞内受损状况明显减轻。结论:电针能够提高糖尿病胃轻瘫大鼠胃肠动力,其作用机制可能与调节mTOR介导的信号通路而激活cajal间质细胞自噬有关。

关键词：电针糖尿病胃轻瘫 cajal间质细胞自噬

电针对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦cajal间质细胞凋亡的影响

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中华糖尿病杂志 2022年第4期14卷 360-366页

作者：肖小娟魏星赵莎彤张天华黎晓宇彭艳湖南中医药大学针灸推拿学院长沙410208

目的探讨电针对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦cajal间质细胞(ICC)凋亡的影响。方法取32只SD大鼠,分为空白对照组、模型组、电针组、胃复安组4组,每组8只。采用血糖仪测量大鼠血糖;酚红灌胃法测量计算胃排空率、小肠推进率;提取胃窦ICC原代细胞培... 详细信息

目的探讨电针对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦cajal间质细胞(ICC)凋亡的影响。方法取32只SD大鼠,分为空白对照组、模型组、电针组、胃复安组4组,每组8只。采用血糖仪测量大鼠血糖;酚红灌胃法测量计算胃排空率、小肠推进率;提取胃窦ICC原代细胞培养,用Western blot方法检测B细胞淋巴瘤蛋白质2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相互作用蛋白(Beclin1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率。4组间各指标的比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD法。结果与空白对照组相比,模型组、电针组和胃复安组血糖水平均上升,胃排空率、小肠推进率均降低,胃窦ICC Bcl-2、Beclin1、Caspase-3的蛋白表达及细胞凋亡率均升高,差异均有统计学意义(P细胞凋亡率均下降,差异均有统计学意义(P细胞凋亡率均下降(P<0.05)。结论电针可能通过调节凋亡相关因子Bcl-2、Beclin1、Caspase-3的表达而抑制胃窦ICC的凋亡。

关键词：糖尿病细胞凋亡糖尿病胃轻瘫 cajal间质细胞电针

基于PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨电针对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦部cajal间质细胞自噬的影响

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针刺研究 2022年第12期47卷 1060-1067页

作者：张天华赵莎彤黎晓宇肖小娟肖乐魏星彭艳湖南中医药大学针灸推拿与康复学院长沙410208

目的:观察电针“足三里”“三阴交”“梁门”对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠血糖、胃排空及胃窦部cajal间质细胞(ICC)自噬及磷酯酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响,探讨电针改善DGP胃肠动力功能... 详细信息

目的:观察电针“足三里”“三阴交”“梁门”对糖尿病胃轻瘫(DGP)大鼠血糖、胃排空及胃窦部cajal间质细胞(ICC)自噬及磷酯酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响,探讨电针改善DGP胃肠动力功能障碍的作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组、3-MA组和3-MA+电针组,每组9只。采用腹腔注射链脲佐菌素结合高脂高糖饲料喂养制备DGP大鼠模型。电针组予单侧“足三里”“三阴交”“梁门”电针治疗,每日1次;3-MA组予3-甲基腺嘌呤(3-MA)腹腔注射,浓度为10 mg/mL,剂量为30 mg·kg^(-1)·d^(-1);3-MA+电针组予3-MA腹腔注射联合电针治疗;每个疗程5 d,共治疗3个疗程。评定大鼠症状积分,测量血糖;酚红灌胃法检测大鼠胃排空率;Western blot法检测胃窦部ICC中微管相关蛋白1轻链3(LC3)、p62、PI3K、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、mTOR的蛋白表达水平;透射电镜观察胃窦部ICC内自噬体数量。结果:造模后,与空白组比较,模型组、电针组、3-MA组和3-MA+电针组症状积分及血糖水平均升高(P细胞内受损较重,未见明显自噬结构;电针组、3-MA+电针组胃窦部ICC细胞内自噬小体数量明显增多,ICC受损状况有所改善。结论:电针可能通过调控PI3K/Akt/mTOR通路调节胃窦部ICC自噬水平,从而改善DGP胃肠动力功能障碍。

关键词：电针糖尿病胃轻瘫 cajal间质细胞自噬 PI3K/Akt/mTOR信号通路