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核糖体28S-D3等位基因特异扩增鉴别微小按蚊亲缘种A和C

Allele-Specific Amplification (PCR-ASA) Method Based on 28S-D3 Region of Ribosomal DNA for Differentiation of Anopheles minimus A and C

作     者:周水森 汤林华 夏明仪 薛海筹 

作者机构:中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所疟疾室上海200025 

出 版 物:《中国媒介生物学及控制杂志》 (Chinese Journal of Vector Biology and Control)

年 卷 期:2003年第14卷第6期

页      面:408-410页

核心收录:

学科分类:1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

主  题:微小按蚊 亲缘种 基因D3 分子鉴别 核糖体 等位基因 

摘      要:目的 建立微小按蚊复合体不同亲缘种A和C的分子鉴别方法。方法 用单蚊蚊腿消化提取基因组DNA ,PCR特异扩增 2 8S第 3结构域 (D3 )基因 ,对PCR产物进行纯化、克隆、测序和序列分析 ;基于序列差异设计特异引物 ,进行等位基因特异扩增 (PCR -ASA) ,根据扩增片段大小区分微小按蚊不同亲缘种。结果 发现微小按蚊不同亲缘种A和C(GeneBank登录号 :AF416782 ,AF42 5 5 94) ,根据二者序列差异设计的特异引物能在普通琼脂糖凝胶上直观地区分两亲缘种 ,两者除在 3 76bp处有一共同条带外 ,分别在 2 94bp和 112bp处出现各自的特异扩增带。结论 我们建立的ASA分子鉴别方法能有效地将我国微小按蚊不同亲缘种A和C区分开来。

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