二氢石蒜碱对棕榈酸诱导H9c2细胞炎性损伤的保护作用及其机制

作     者：徐文芳 金红花 XU Wen-fang;JIN Hong-hua

作者机构：延边大学药学院吉林延吉133002 延边大学附属医院药学部吉林延吉133002 

出 版 物：《中药材》 (Journal of Chinese Medicinal Materials)

年 卷 期：2022年第45卷第10期

页      面：2460-2465页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81860077) 

主　　题：二氢石蒜碱 棕榈酸 H9c2细胞炎性损伤 TLR4 p-PI3K p-AKT p-mTOR 活性氧 

摘      要：目的:研究二氢石蒜碱对棕榈酸诱导H9c2细胞炎性损伤的影响并探讨其机制。方法:建立棕榈酸诱导H9c2细胞炎性损伤细胞模型,采用CCK-8法筛选二氢石蒜碱的最佳给药浓度。将培养的H9c2细胞随机分为正常对照组、模型组、LY294002组、雷帕霉素组及二氢石蒜碱低、中、高浓度组。蛋白免疫印迹法检测H9c2细胞中TLR4、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达;免疫荧光染色及流式细胞术检测二氢石蒜碱对棕榈酸诱导H9c2细胞内活性氧(ROS)产生水平的影响。结果:采用棕榈酸100μmol/L建立H9c2细胞炎性损伤模型,CCK-8实验筛选出二氢石蒜碱组在1、10、50μmol/L下细胞存活率都在80%以上,分别确定为低、中、高给药浓度。蛋白免疫印迹实验表明,二氢石蒜碱预处理能显著下调棕榈酸诱导下H9c2细胞的TLR4、p-PI3K、p-mTOR蛋白表达,上调p-AKT蛋白表达(P0.05或P0.01),其作用呈浓度依赖性;PI3K/AKT抑制剂LY294002可抑制p-AKT蛋白表达,mTOR抑制剂雷帕霉素可抑制p-mTOR蛋白表达(P0.01)。免疫荧光染色及流式细胞术结果表明二氢石蒜碱对炎性损伤H9c2细胞内ROS产生有显著的抑制作用(P0.01)。结论:二氢石蒜碱对棕榈酸诱导的H9c2细胞炎性损伤具有保护作用,其机制可能与抑制TLR4、p-PI3K、p-mTOR蛋白表达,促进AKT蛋白磷酸化,抑制炎性损伤H9c2细胞内ROS的产生相关。