NCOA4介导的铁蛋白自噬参与LPS诱导的心肌细胞铁死亡

作     者：郭立春 曹国栋 罗茜晴 林靓 赵宇含 曾佑成 张艺馨 程青虹 GUO Lichun;CAO Guodong;LUO Xiqing;LIN Jing;ZHAO Yuhan;ZENG Youcheng;ZHANG Yixin;CHENG Qinghong

作者机构：石河子大学医学院新疆石河子832000 石河子大学医学院第一附属医院重症二科 

出 版 物：《陆军军医大学学报》 (Journal of Army Medical University)

年 卷 期：2022年第44卷第23期

页      面：2401-2408页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金地区科学基金项目(81860336) 兵团科技攻关与成果转化计划项目(2016AD003) 

主　　题：铁蛋白自噬 铁死亡 脓毒症 心肌细胞损伤 

摘      要：目的探讨核受体辅激活因子4(nuclear receptor coactivator 4,NCOA4)介导的铁蛋白(Ferritin)自噬是否参与脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的脓毒症心肌细胞铁死亡的发生。方法采用不同剂量(5、10、20μg/mL)的LPS诱导大鼠心肌细胞H9c2形成脓毒症心肌细胞损伤体外模型,以正常H9c2细胞作为Control组。应用试剂盒检测心肌细胞活力、Fe^(2+)、心肌酶释放水平变化与氧化应激水平;荧光探针检测细胞线粒体膜电位水平变化;免疫荧光检测NCOA4、Ferritin在心肌细胞中的表达定位;应用小干扰RNA(si RNA)降低H9c2细胞中的NCOA4的表达,Western blot检测铁死亡调控蛋白、自噬蛋白表达水平。结果不同剂量LPS刺激后H9c2细胞活力明显降低(P0.05),Fe^(2+)浓度升高(P0.05),丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)等细胞氧化应激的水平升高(P0.05),线粒体膜电位降低(P0.05),荧光镜下观察到NCOA4-Ferritin共定位表达增加(P0.05),铁死亡调控蛋白NCOA4表达增加(P0.05),Ferritin、SLC7A11、GPX4的表达水平下降(P0.05),自噬蛋白LC3-Ⅱ表达增加(P0.05)。慢病毒敲低NCOA4表达,Ferritin、SLC7A11、GPX4的表达增加(P0.05),LC3-Ⅱ表达水平下降(P0.05)。结论NCOA4介导的铁蛋白自噬参与了脓毒症心肌细胞铁死亡的发生过程。