内质网应激与非折叠蛋白反应激活对骨骼肌纤维免疫行为的调控作用

作     者：黄静雯 张任飞 菅晓婷 廖钊宏 蓝海强 黄涛 胡稷杰 廖华 HUANG Jing-wen;ZHANG Ren-fei;JIAN Xiao-ting;LIAO Zhao-hong;LAN Hai-qiang;HUANG Tao;HU Ji-jie;LIAO Hua

作者机构：南方医科大学基础医学院人体解剖学教研室广州510515 绵阳市第三人民医院检验科四川绵阳612000 南方医科大学南方医院创伤骨科广州510515 

出 版 物：《解剖学报》 (Acta Anatomica Sinica)

年 卷 期：2022年第53卷第6期

页      面：727-736页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81572102) 广东省自然科学基金(2019A1515011305) 广州市科技计划项目(202002030497) 广东省基础与应用基础研究基金(2021A1515010010) 

主　　题：肌纤维 内质网应激 非折叠蛋白反应 肌醇需要酶1α 原代细胞培养 免疫印迹法 小鼠 

摘      要：目的 探讨干扰素-γ(IFN-γ)诱导的炎症环境中,骨骼肌纤维内质网应激(ERS)与非折叠蛋白反应(UPR)的激活对肌纤维免疫行为的调控作用。方法 体外培养的C57BL/6小鼠原代成肌干细胞,经马血清分化成多核肌管后分成以下10组:1.对照组;***-γ组;3.衣霉素(TM)组;4.毒胡萝卜素(TG)组;***-γ+4-苯基丁酸(4-PBA)联合处理组;***-γ+TG+4-PBA联合处理组;***-γ+4μ8c联合处理组;***-γ+TG+4μ8c联合处理组;***-γ+GSK2606414联合处理组;***-γ+TG+GSK2606414联合处理组,并进行对应的处理。利用Real-time PCR检测相关肌细胞因子基因水平;免疫荧光观察UPR关键分子:真核翻译起始因子2α(eIF2α)、肌醇需要酶1α(IRE1α)、转录激活因子6(ATF6)在肌纤维内的表达;Western blotting检测肌细胞相关免疫分子和肌细胞因子及UPR关键分子;Luminex分析肌纤维内促炎症的肌细胞因子的蛋白水平。结果 IFN-γ诱导的炎症环境中,肌纤维H-2K~b、H2-Ea、Toll样受体3(TLR3)以及p-eIF2α、p-IRE1α表达上调;添加UPR抑制剂4-PBA的分组肌纤维H-2K~b、 H2-Ea、TLR3以及肌细胞因子的表达较IFN-γ组下调,添加IRE1α特异性抑制剂4μ8c的分组上述分子表达较IFN-γ组亦下调,而添加蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)特异性抑制剂GSK2606414的分组则无明显变化。结论 IFN-γ诱导的炎症环境中,UPR-IRE1α通路激活并抑制肌纤维免疫相关分子合成,从而进一步抑制肌纤维介导的免疫反应,有利于肌再生。