人工设计短肽PF1和PF2的克隆表达及其对葡萄糖氧化酶活性的影响

作     者：李传博 鲁明杰 张庆芳 林禹彤 窦少华 LI Chuanbo;LU Mingjie;ZHANG Qingfang;LIN Yutong;DOU Shaohua

作者机构：大连大学生命健康学院辽宁省海洋微生物工程技术研究中心辽宁大连116622 

出 版 物：《食品科学》 (Food Science)

年 卷 期：2022年第43卷第22期

页      面：215-220页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0703[理学-化学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：西藏自治区科技厅十四五重大专项(03228003) 辽宁省自然科学基金项目(2014020134) 大连大学博士启动基金项目(2019QL005) 

主　　题：葡萄糖氧化酶 带电荷短肽 克隆表达 

摘      要：人工设计并合成2条等电点分别为12.01和3.18的短肽PF1、PF2,基因全长均为309 bp。以PF1-F、PF1-R、PF2-F和PF2-R为引物,扩增至pET-30a(+)载体中进行克隆表达。经Ni-NTA分离纯化得到纯蛋白。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳与Western Blot分析表明:表达出的目的蛋白与预期估算大小一致。纯化后的短肽加入葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GOD)催化作用体系中,表明纯化后的短肽分别使GOD活力提高8.34%和降低6.88%。因此可以说明,人工设计的不同电短肽PF1、PF2可以促进或抑制GOD的催化作用,进一步拓宽GOD在食品发酵和食品保鲜方面的应用范围。