吴茱萸碱对视网膜母细胞瘤细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响

作     者：赵静 杨洪涛 裴存文 ZHAO Jing;YANG Hongtao;PEI Cunwen

作者机构：承德市中心医院眼科河北省承德市067000 

出 版 物：《眼科新进展》 (Recent Advances in Ophthalmology)

年 卷 期：2022年第42卷第11期

页      面：863-867,878页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100212[医学-眼科学] 10[医学] 

基　　金：河北省承德市科技计划项目(编号:201701A020) 

主　　题：视网膜母细胞瘤 吴茱萸碱 整合素β2-反义RNA1 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡 

摘      要：目的探讨吴茱萸碱对视网膜母细胞瘤细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响,分析整合素β2-反义RNA1(ITGB2-AS1)在视网膜母细胞瘤中的表达和作用。方法取对数生长期HXO-Rb44细胞铺在96孔板上,用终浓度为1μmol·L^(-1)、2μmol·L^(-1)、4μmol·L^(-1)吴茱萸碱处理细胞24 h,记为吴茱萸碱1μmol·L^(-1)组、吴茱萸碱2μmol·L^(-1)组、吴茱萸碱4μmol·L^(-1)组,同时将不经吴茱萸碱处理的细胞设为对照组;按照Lipofectamine 2000试剂盒说明书将si-NC、si-ITGB2-AS1转染细胞,记为si-NC组、si-ITGB2-AS1组;将pcDNA、pcDNA-ITGB2-AS1转染细胞,再用4μmol·L^(-1)吴茱萸碱处理,记为吴茱萸碱4μmol·L^(-1)+pcDNA组、吴茱萸碱4μmol·L^(-1)+pcDNA-ITGB2-AS1组。采用MTT法测定细胞存活率,平板克隆实验计数克隆形成数,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况,qRT-PCR检测ITGB2-AS1表达。结果吴茱萸碱2μmol·L^(-1)组、吴茱萸碱4μmol·L^(-1)组细胞存活率和克隆形成数较对照组、吴茱萸碱1μmol·L^(-1)组减小,差异均有统计学意义(均为P0.05);吴茱萸碱4μmol·L^(-1)组细胞存活率和克隆形成数较吴茱萸碱2μmol·L^(-1)组减小,差异均有统计学意义(均为P0.05)。吴茱萸碱2μmol·L^(-1)组、吴茱萸碱4μmol·L^(-1)组G_(0)-G_(1)期细胞比例较对照组、吴茱萸碱1μmol·L^(-1)组下降,G_(2)-M期细胞比例较对照组、吴茱萸碱1μmol·L^(-1)组升高,差异均有统计学意义(均为P0.05);吴茱萸碱4μmol·L^(-1)组G_(0)-G_(1)期细胞比例较吴茱萸碱2μmol·L^(-1)组下降,G_(2)-M期细胞比例较吴茱萸碱2μmol·L^(-1)组升高,差异均有统计学意义(均为P0.05)。吴茱萸碱2μmol·L^(-1)组、吴茱萸碱4μmol·L^(-1)组细胞凋亡率较对照组、吴茱萸碱1μmol·L^(-1)组升高,ITGB2-AS1表达量较对照组、吴茱萸碱1μmol·L^(-1)组降低,差异均有统计学意义(均为P0.05);吴茱萸碱4μmol·L^(-1)组细胞凋亡率较吴茱萸碱2μmol·L^(-1)组升高,ITGB2-AS1表达量较吴茱萸碱2μmol·L^(-1)组降低,差异均有统计学意义(均为P0.05)。si-ITGB2-AS1组ITGB2-AS1表达量、细胞存活率、克隆形成数和G_(0)-G_(1)期细胞比例均较si-NC组降低,G_(2)-M期细胞比例、细胞凋亡率均较si-NC组升高,差异均有统计学意义(均为P0.05)。吴茱萸碱4μmol·L^(-1)+pcDNA-ITGB2-AS1组细胞ITGB2-AS1表达量、细胞存活率和克隆形成数均较吴茱萸碱4μmol·L^(-1)+pcDNA组升高,差异均有统计学意义(均为P0.05)。吴茱萸碱4μmol·L^(-1)+pcDNA-ITGB2-AS1组G_(0)-G_(1)期细胞比例较吴茱萸碱4μmol·L^(-1)+pcDNA组高,G_(2)-M期细胞比例、细胞凋亡率较吴茱萸碱4μmol·L^(-1)+pcDNA组低,差异均有统计学意义(均为P0.05)。结论吴茱萸碱通过抑制ITGB2-AS1表达降低视网膜母细胞瘤细胞增殖,阻滞G_(2)-M期细胞周期,并促进细胞凋亡。