淫羊藿苷通过RANKL-p38/ERK-NFAT通路抑制硫代乙酰胺诱导的破骨分化

作     者：程琳燕 金晓丽 陈煊威 陈瑾 任军 黄慧 许健 CHENG Lin-yan;JIN Xiao-li;CHEN Xuan-wei;CHEN Jin;REN Jun;HUANG Hui;XU Jian

作者机构：浙江中医药大学医学技术与信息工程学院浙江杭州310053 

出 版 物：《中国中药杂志》 (China Journal of Chinese Materia Medica)

年 卷 期：2022年第47卷第21期

页      面：5882-5889页

核心收录：

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：浙江省自然科学基金项目(LY19H060001) 浙江省中医药科技计划项目(2022ZB093)。 

主　　题：硫代乙酰胺 淫羊藿苷 破骨分化 骨溶解 核因子κB受体活化因子配体 

摘      要：探究淫羊藿苷(icariin, ICA)对硫代乙酰胺(thioacetamide, TAA)诱导的大鼠股骨骨溶解的治疗作用和机制。用TAA和ICA干预RAW264.7细胞,CCK-8法检测TAA和ICA对细胞增殖活力的影响,抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase, TRAP)染色检测破骨细胞形成情况,Western blot和免疫荧光法检测细胞中破骨相关蛋白TRAP、cathepsin K、c-Fos和NFATc1的表达水平。SD大鼠32只,随机分为对照组、TAA组(TAA腹腔注射300 mg·kg-1)、ICA组(ICA灌胃600 mg·kg-1),TAA+ICA组(TAA腹腔注射300 mg·kg-1同时ICA灌胃600 mg·kg-1),隔天给药1次,持续6周。处死时记录体质量和股骨长度,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)和TRAP染色观察股骨病理损伤和破骨细胞分化情况,检测血清中骨代谢相关指标碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)、钙(Ca)、磷(P)、镁(Mg)和Ⅰ型胶原N末端肽(typeⅠcollagen crosslinked N-telopeptides, NTX-I)的变化,三点弯曲实验和micro-CT评估股骨质量,Western blot法检测破骨相关蛋白TRAP、cathepsin K、RANK、RANKL、p38、p-p38、ERK、p-ERK、JNK、p-JNK、c-Fos和NFATc1的表达水平。结果发现,ICA可以抑制TAA诱导的TRAP阳性细胞的产生,抑制破骨相关蛋白的表达并抑制NFATc1的核易位。ICA可以缓解TAA诱导的SD大鼠体质量和股骨长度减少及生长受抑,改善TAA造成的股骨弹性模量的下降,使骨小梁骨密度(bone mineral density, BMD)、骨小梁形态因子(trabecular pattern factor, Tb.Pf)、骨小梁数量(trabecular number, Tb.N)、骨小梁厚度(trabecular thickness, Tb.Th)和结构模型指数(structure model index, SMI)等参数显著恢复,从而改善骨结构。Western blot结果显示,ICA通过RANKL-p38/ERK-NFATc1信号通路抑制由TAA导致的大鼠股骨破骨分化。ICA通过下调RANKL-p38/ERK-NFAT信号通路抑制破骨细胞分化,防止TAA诱导的骨溶解。