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帕屈磷酸钠对W_(256)肿瘤引起大鼠骨溶解作用的影响

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中国药理学通报 1998年第4期14卷 373-375页

作者：李卫平余华宝王斌王迎新李华陈敏珠冷宗康严明达安徽医科大学药理学教研室合肥市卫生干部学校南京药物研究所深圳海王药业有限公司

目的研究帕屈磷酸钠对Ｗ２５６肿瘤引起大鼠骨溶解作用的影响。方法除正常组以外，每鼠右后肢胫骨上端骨旁肌肉内注入０．２ｍｌＷ２５６瘤细胞悬液（４×１０６个瘤细胞），ｄ１２可引起大鼠局部骨组织溶解、破坏及血钙和钙排泄增加等... 详细信息

目的研究帕屈磷酸钠对Ｗ２５６肿瘤引起大鼠骨溶解作用的影响。方法除正常组以外，每鼠右后肢胫骨上端骨旁肌肉内注入０．２ｍｌＷ２５６瘤细胞悬液（４×１０６个瘤细胞），ｄ１２可引起大鼠局部骨组织溶解、破坏及血钙和钙排泄增加等变化。结果帕屈磷酸钠（ＡＰＤ，７．５、１５与３０ｍｇ·ｋｇ－１），一次性尾静脉注射对Ｗ２５６性溶骨大鼠的血钙和尿钙升高以及骨矿含量的降低均有明显的防治作用，经ＰＯＳ型显微光密度仪对鼠股骨和胫骨Ｘ光片扫描分析的结果表明，ＡＰＤ（３０ｍｇ·ｋｇ－１）对Ｗ２５６引起的大鼠骨密度降低也有明显的防治作用。结论帕屈磷酸钠对Ｗ２５６引起的大鼠溶骨及并发症具有良好的防治作用。

关键词：帕屈磷酸钠高血钙骨质疏松肿瘤骨溶解

小干扰RNA沉默TNF-α表达并抑制骨溶解的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2013年第8期27卷 994-999页

作者：余博郝绍文孙首选郭浩辉杨小春马晓军金群华宁夏医科大学总医院骨三科银川750004

目的通过构建沉默TNF-α的重组腺病毒并观察其对小鼠假体骨溶解模型的影响,探讨基因治疗人工关节假体周围骨溶解的可能性。方法设计沉默TNF-α的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)编码序列的引物,扩增后利用RAPAD腺病毒包装系统... 详细信息

目的通过构建沉默TNF-α的重组腺病毒并观察其对小鼠假体骨溶解模型的影响,探讨基因治疗人工关节假体周围骨溶解的可能性。方法设计沉默TNF-α的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)编码序列的引物,扩增后利用RAPAD腺病毒包装系统将该序列载入腺病毒,并构建出E1、E3区双缺失的重组腺病毒Ad5-TNF-α-siRNA-CMVeGFP。取8～10周龄SPF级BABL/C雌性小鼠64只,体重20～25 g,随机分为4组(n=16)。空白对照组(A组)制备假体模型,颗粒对照组(B组)、空病毒组(C组)、治疗组(D组)制备假体松动骨溶解模型;造模第2周开始向关节腔内分别注入以下溶液(两次各注射40μL):A组注入PBS溶液,24 h后再次注入;B、C、D组注入钛颗粒悬浊液,24 h后分别注入PBS溶液、腺病毒Ad5 E1-CMVeGFP溶液(1×109PFU/mL)、重组腺病毒Ad5-TNF-α-siRNA-CMVeGFP溶液(1×109PFU/mL);每隔2周重复1次至第10周。术后观察小鼠一般情况,术后12周取材进行组织学观察及Westernblot检测TNF-α表达。结果目的基因载入腺病毒载体后经双切酶鉴定及DNA测序确定获得阳性克隆,重组腺病毒Ad5-TNF-α-siRNA-CMVeGFP成功转染HEK293细胞。术后各组小鼠均存活至实验完成。组织学观察示,A组炎性细胞及破骨细胞少,骨质形成良好;B、C组见大量炎性细胞浸润,破骨细胞多,骨质破坏明显;D组少量炎性细胞浸润,破骨细胞较B、C组少,未出现明显骨质破坏。各组界膜厚度及破骨细胞计数均为A组骨溶解。

关键词：关节置换骨溶解基因治疗 TNF-α 重组腺病毒小干扰RNA 小鼠

氧化应激对磷酸三钙磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解的影响及其机制

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中国应用生理学杂志 2018年第4期34卷 355-359页

作者：刘坚荣毛红娇郭高力傅晶蕾童夏钱沁清骆华刚张云绍兴文理学院医学院基础医学部浙江绍兴312000

目的:探讨氧化应激对磷酸三钙(TCP)磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解的影响及其作用机制。方法:36只雄性ICR小鼠随机分为3组(n=12):假手术(Sham)组、TCP磨损颗粒(TCP)组和N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)组。将TCP磨损颗粒30 mg包埋于小鼠颅骨顶部... 详细信息

目的:探讨氧化应激对磷酸三钙(TCP)磨损颗粒诱导的假体周围骨溶解的影响及其作用机制。方法:36只雄性ICR小鼠随机分为3组(n=12):假手术(Sham)组、TCP磨损颗粒(TCP)组和N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)组。将TCP磨损颗粒30 mg包埋于小鼠颅骨顶部构建假体周围骨溶解模型,于术后第2天颅顶骨膜局部注射NAC(1.0 mg/kg),隔日1次,持续2周后处死动物采血、取颅骨。抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察小鼠颅骨假体周围骨溶解情况; ELISA和化学比色法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和总抗氧化能力(T-AOC)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性; Western blot检测假体周围骨组织中内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、磷酸化PERK(p-PERK)、真核细胞翻译起始因子2α(eIF2α)和磷酸化eIF2α(p-eIF2α)的表达。结果:与Sham组比较,TCP组小鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平及假体周围骨溶解面积显著增加(P骨溶解面积明显减少(P骨溶解,其机制可能与PERK/eIF2α通路的失活有关。

关键词： TCP磨损颗粒骨溶解氧化应激 PERK/eIF2α通路小鼠

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骨肉瘤骨溶解作用机制的研究进展

中华骨科杂志 2022年第17期42卷 1156-1164页

作者：蒋小红刘云谢天裕韦庆军广西医科大学附属民族医院骨科南宁530001 广西医科大学第一附属医院脊柱骨病外科南宁530021 广西医科大学第一附属医院创伤骨科手外科南宁530021

骨肉瘤是儿童和青少年最常见的原发恶性骨肿瘤。骨溶解是所有骨肉瘤(传统型、髓内和骨膜骨肉瘤)的共同病理改变。但骨溶解的具体机制不明,许多学者从不同角度对此进行了研究。骨溶解是一个生理性骨重建被劫持利用及过度骨吸收的过程,破... 详细信息

骨肉瘤是儿童和青少年最常见的原发恶性骨肿瘤。骨溶解是所有骨肉瘤(传统型、髓内和骨膜骨肉瘤)的共同病理改变。但骨溶解的具体机制不明,许多学者从不同角度对此进行了研究。骨溶解是一个生理性骨重建被劫持利用及过度骨吸收的过程,破骨细胞作为人体内唯一具有骨吸收功能的细胞,在骨肉瘤骨溶解的病理过程中发挥关键作用。破骨细胞即可通过分泌高浓度的酸性物质和胶原酶主导骨溶解,也可通过与骨肉瘤细胞相互作用协同介导骨肉瘤骨溶解的发生和发展。同时,骨溶解是骨肉瘤病理过程的关键部分,可促进骨肉瘤的发生和发展并形成恶性循环。因此,抑制骨溶解对打破此循环进而抑制骨肉瘤的发生和发展具有重要意义。但是,骨肉瘤细胞与破骨细胞间的具体调控机制以及骨肉瘤的其他细胞是否也参与了该病理学过程仍不清楚。目前治疗骨肉瘤骨溶解的药物主要有双膦酸盐、小分子抑制剂和天然化合物等,但其疗效及机制尚未明确,相关研究仍处于起步阶段。既往对肿瘤性骨溶解的研究大多集中于转移性骨肿瘤,而近年来针对骨肉瘤骨溶解的研究获得越来越多学者的关注。对破骨细胞和骨肉瘤细胞在肿瘤介导的骨溶解中的作用机制以及这两类细胞作为治疗靶点的药物治疗现状进行综述和分析,更深刻地理解骨溶解在骨肉瘤发生及发展中的作用,有利于为骨肉瘤相关骨溶解的治疗提供理论依据和方向。

关键词：骨溶解骨肉瘤细胞小分子抑制剂转移性骨肿瘤肿瘤性破骨细胞天然化合物酸性物质

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骨溶解与人工关节后期松动

中华骨科杂志 1997年第1期17卷 3-4页

作者：戴克戎上海第二医科大学附属第九人民医院骨科

骨溶解与人工关节后期松动戴克戎我国人工关节的设计、制作和安装技术的总体水平虽然仍与国际水平存在差距，但其近、中期效果近年来已有较大提高。由于置换术后长期病例的增多，使我们也开始面临国外学者所面临的同样挑战：人工关节后... 详细信息

骨溶解与人工关节后期松动戴克戎我国人工关节的设计、制作和安装技术的总体水平虽然仍与国际水平存在差距，但其近、中期效果近年来已有较大提高。由于置换术后长期病例的增多，使我们也开始面临国外学者所面临的同样挑战：人工关节后期松动。目前，国内也已开始在临床和...

关键词：人工关节骨溶解人工关节松动

VEGF抗体抑制磨损颗粒诱导骨溶解的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2012年第6期26卷 647-651页

作者：戴闽钟艳春宗凌杨小刚程明杨康骅南昌大学第一附属医院骨科南昌330006 中山大学附属第一医院耳鼻喉科医院

目的通过观察局部注射VEGF及VEGF抗体对小鼠植骨气囊模型中磨损颗粒诱导骨溶解的影响,探讨VEGF在人工关节无菌性松动中的作用。方法取人工髋关节翻修术取出的金属关节假体柄,参照真空球磨法体外制备磨损颗粒,PBS配制成浓度为10 mg/mL颗... 详细信息

目的通过观察局部注射VEGF及VEGF抗体对小鼠植骨气囊模型中磨损颗粒诱导骨溶解的影响,探讨VEGF在人工关节无菌性松动中的作用。方法取人工髋关节翻修术取出的金属关节假体柄,参照真空球磨法体外制备磨损颗粒,PBS配制成浓度为10 mg/mL颗粒悬液。取8～10周龄雌性昆明小鼠50只,体重约25 g。10只作为气囊植骨模型颅骨供体。剩余40只小鼠随机分为4组(n=10),分别为空白对照组(A组)、颗粒组(B组)、VEGF刺激组(C组)和VEGF抑制组(D组);小鼠背部皮下注射无菌空气制备气囊,第8天切开气囊植入颅骨骨片,制备植骨气囊模型。于植骨后第1天B、C、D组气囊内注入0.5 mL颗粒悬液,A组注入0.5 mL PBS。气囊制备期间第6、7天及植骨后隔天,C、D组气囊内分别注射0.2 mL重组人VEGF和Bevacizumab溶液,A、B组注射0.2 mL生理盐水。植骨2周后取囊壁连同骨片行HE染色、实时荧光定量PCR及ELISA检测。结果各组小鼠均存活至实验完成。大体观察见A组气囊红肿程度轻,新生血管少;B、C、D组气囊明显红肿,可见较多渗出及新生血管,其中C组最重,B组次之,D组介于A、B组间。组织学及分子生物学检测发现,B组囊壁明显炎性反应及骨溶解,囊壁厚度、细胞密度及TNF-α、IL-1β、VEGF表达均较A组明显增加(P骨溶解最显著,以上观察指标均高于B组(P骨溶解,但以上指标均低于B组(P骨溶解作用,局部给予VEGF抗体可抑制磨损颗粒诱导的骨溶解。

关键词：人工关节无菌性松动 VEGF VEGF抗体骨溶解小鼠

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假膜成纤维细胞诱导的裸鼠骨溶解模型

中国组织工程研究与临床康复 2007年第36期11卷 7181-7184页

作者：张楠心沈灏陶昆张先龙上海交通大学附属第六人民医院骨科上海市200233

目的:观察应用假膜成纤维细胞在裸鼠颅骨上构建人工关节周围骨溶解体内模型的可行性。方法:实验于2006-05/2007-04在上海市第六人民医院中心实验室和动物实验室完成。①实验材料:取8周龄裸鼠15只,随机数字表法分为假膜成纤维细胞组、关... 详细信息

目的:观察应用假膜成纤维细胞在裸鼠颅骨上构建人工关节周围骨溶解体内模型的可行性。方法:实验于2006-05/2007-04在上海市第六人民医院中心实验室和动物实验室完成。①实验材料:取8周龄裸鼠15只,随机数字表法分为假膜成纤维细胞组、关节囊成纤维细胞组、假手术组,5只/组。假膜、关节囊组织分别从人工关节无菌性松动翻修术及初次人工关节置换术中取得,患者均签署知情同意书。②实验方法:在全髋翻修术中取出假体周围的假膜以及初次全髋置换时的关节囊组织,各自分离出成纤维细胞,于每毫升细胞悬液中加入50μg骨水泥颗粒,刺激24h后加入巨噬细胞集落刺激因子。假膜成纤维细胞组、关节囊成纤维细胞组建立骨溶解模型,麻醉后切开头皮暴露颅中缝,分别注入经骨水泥颗粒刺激的对应细胞悬液100μL。假手术组仅注入等量含有巨噬细胞集落刺激因子的细胞培养基。③实验评估:各组裸鼠14d后处死,完整取出颅盖骨,应用乙二胺四乙酸脱钙1个月,制作切片行苏木精-伊红染色,观察颅中缝的骨溶解情况。同时应用IPP图像软件定量分析骨溶解区域的面积,以判断骨吸收情况。结果:15只裸鼠均进入结果分析。①假膜成纤维细胞的表型特点:假膜来源的细胞贴壁生长一段时间后,表现为形态各异的单个核细胞,三四次传代后几乎所有的细胞均呈纺锤状,脯氨酰-4-羟化酶染色呈阳性。②裸鼠颅盖骨的骨溶解情况:与关节囊成纤维细胞组和假手术组相比,假膜成纤维细胞组表现出明显的骨吸收,其骨溶解面积明显升高(P骨溶解形成,可作为分析人工关节周围骨溶解的动物模型。

关键词：假膜成纤维细胞动物模型骨溶解

汉防己甲素干预假体周围磨损颗粒诱导下骨溶解模型的体外实验

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中国组织工程研究 2021年第15期25卷 2358-2363页

作者：刘子歌刘心蕊李燕宋国瑞张晨陈德胜宁夏医科大学临床医学院宁夏回族自治区银川市750004 生育力保持教育部重点实验室宁夏生殖与遗传重点实验室宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学基础医学院宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学总医院骨科宁夏回族自治区银川市750004

背景:国内鲜有关于汉防己甲素对磨损颗粒诱导的破骨细胞形成与分化方面的相关研究。目的:探讨汉防己甲素在不同浓度作用下对钛颗粒诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞体外骨溶解模型的积极作用。方法:将小鼠RAW264.7巨噬细胞分为5组培养:空白组... 详细信息

背景:国内鲜有关于汉防己甲素对磨损颗粒诱导的破骨细胞形成与分化方面的相关研究。目的:探讨汉防己甲素在不同浓度作用下对钛颗粒诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞体外骨溶解模型的积极作用。方法:将小鼠RAW264.7巨噬细胞分为5组培养:空白组,实验组(含0.1 g/L钛颗粒悬液),低、中、高浓度药物组(实验组成分+0.1,0.5,1.0μmol/L汉防己甲素)。CCK-8法检测RAW264.7细胞的增殖活性;抗酒石酸酸性磷酸酶和鬼笔环钛染色法检测成熟破骨细胞的功能和数量;酶联免疫法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α和基质金属蛋白酶9的表达;RT-PCR检测活化T细胞核因子c1、肿瘤坏死因子α和基质金属蛋白酶9的mRNA表达;Western blot法检测核转录因子κBp65、IκBα两者磷酸化蛋白的水平。结果与结论:①与空白组比较,各浓度的汉防己甲素对RAW264.7细胞增殖没有影响(P>0.05);②对照组可观察到较多体积较大、酒红色、F-actin环被荧光绿染的多核破骨细胞,而应用不同浓度的汉防己甲素处理后,破骨的细胞数显著降低(P骨溶解模型产生积极作用。

关键词：汉防己甲素钛颗粒核转录因子κB 无菌性松动骨溶解人工假体

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假体周围骨溶解动物模型的研究概况

中国组织工程研究 2018年第15期22卷 2421-2426页

作者：巩栋吴国泰甄平甘肃中医药大学甘肃省兰州市730000 解放军兰州总医院骨科甘肃省兰州市730000 甘肃省中药药理与毒理学重点实验室甘肃省兰州市730000

背景:假体周围骨溶解动物模型的建立方法多种多样,选择不同造模动物、不同造模方法所建立的假体周围骨溶解模型具有各自的特点。目的:总结分析假体周围骨溶解动物模型的研究概况和各类模型所具有的特点,为相关研究提供参考。方法:应用... 详细信息

背景:假体周围骨溶解动物模型的建立方法多种多样,选择不同造模动物、不同造模方法所建立的假体周围骨溶解模型具有各自的特点。目的:总结分析假体周围骨溶解动物模型的研究概况和各类模型所具有的特点,为相关研究提供参考。方法:应用计算机检索Pub Med数据库中1999年1月至2017年5月有关假体周围骨溶解动物模型的文章,检索词为"animal model,osteolysis",同时计算机检索中国期刊全文数据库同期骨溶解动物模型的相关文章,检索词为"动物模型,骨溶解",排除其中与骨溶解动物模型无关的文章,选取经典的和近期发表的文章。结果与结论:(1)人工诱导的动物模型是目前假体周围骨溶解动物模型建立的主要方法,在研究骨溶解的发病机制、病理过程、治疗方法等方面应用广泛;(2)小型动物模型具有廉价易得、快速周转、来源可控、均匀稳定的遗传背景等优点,但其骨溶解是急性溶骨过程,与人工关节松动发生的慢性骨溶解过程有一定的差别;(3)大动物模型与人类假体周围骨溶解过程更为相似,但成本高,饲养难,操作要求高而限制了其广泛使用;(4)能够兼具两者优点的创新性模型也在不断探索发展中,在选择模型时应根据研究条件和需要进行综合考虑。

关键词：骨科植入物人工假体关节置换假体骨溶解动物模型综述国家自然科学基金