酵母抽提物FM888对CHO细胞生长的影响

作     者：万莹铚 李秋霞 张宏岐 邹坤 肖萌 伍业旭 张松 邓锐 WAN Ying-zhi;LI Qiu-xia;ZHANG Hong-qi;ZOU Kun;XIAO Meng;WU Ye-xu;ZHANG Song;DENG Rui

作者机构：三峡大学生物与制药学院三峡大学天然产物研究与利用湖北省重点实验室湖北宜昌443002 三峡大学医学院湖北宜昌443002 安琪酵母股份有限公司湖北宜昌443003 湖北宏裕新型包材股份有限公司湖北宜昌443000 

出 版 物：《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)

年 卷 期：2022年第35卷第10期

页      面：1184-1190页

学科分类：08[工学] 09[农学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81773952) 湖北省科学技术厅项目(2018BFC373) 安琪酵母股份有限公司科研专项(SDH2019215) 

主　　题：酵母抽提物FM888 CHO细胞 细胞代谢 细胞增殖 

摘      要：目的 探讨酵母抽提物(yeast extract,YE)FM888对CHO细胞生长的影响。方法 以CHO悬浮细胞为研究对象,在EmCD CHO® Medium培养基中分别添加1、2、3、5 g/L的FM888,进行摇瓶批式培养,台盼蓝拒染法和细胞计数仪测定活细胞密度和细胞活率。用添加1、2 g/L FM888的EmCD CHO® Medium培养基培养CHO细胞,生化分析仪检测细胞的生化代谢(葡萄糖、乳酸、谷氨酰胺、谷氨酸和铵根离子的含量)情况;采用相应试剂盒检测乳酸脱氨酶(lactate dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)的活力;流式细胞术检测细胞的周期分布及凋亡情况。结果 培养基中加入1、2 g/L的FM888可促进CHO细胞生长,确保培养过程中维持较高活细胞密度和细胞活率;CHO细胞培养前期,葡萄糖、乳酸和铵根离子在培养体系中的浓度均高于空白对照组(未添加FM888),谷氨酰胺低于空白对照组,能够促进细胞代谢活动,培养后期逐渐下降;可减少细胞损伤及CHO细胞酶的释放;可增加CHO细胞S期的比例,促进细胞增殖;可降低CHO细胞凋亡率。结论 培养基中添加1、2 g/L的FM888能促进CHO细胞的生长、代谢和增殖,并维持较高的细胞活力。