冻干狂犬病疫苗热原检测在HL-60单核细胞激活实验中的方法转移和验证研究

作     者：杨泽岸 陈晨 张媛 王灿 高华 吴彦霖 YANG Ze-an;CHEN Chen;ZHANG Yuan;WANG Can;GAO Hua;WU Yan-lin

作者机构：中国食品药品检定研究院北京102629 上海食品药品检验所上海201203 

出 版 物：《中国药理学通报》 (Chinese Pharmacological Bulletin)

年 卷 期：2022年第38卷第10期

页      面：1586-1590页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100101[医学-人体解剖与组织胚胎学] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

基　　金：国家“重大新药创制”专项“创新生物技术药评价及标准化关键技术研究”(2018ZX09101001)。 

主　　题：方法转移 方法验证 单核细胞激活实验 热原检测 白介素6 人早幼粒白血病HL-60细胞 冻干人用狂犬病疫苗 

摘      要：目的研究人早幼粒白血病HL-60单核细胞激活实验在人狂犬疫苗冻干人用狂犬病疫苗热原检测中的可行性。方法将已建立的HL-60单核细胞激活实验进行实验室间方法转移,并进行方法验证;参照《中国药典》细菌内毒素检查法中光度测定法中的干扰试验,用HL-60-IL-6单核细胞激活实验检测13批冻干人用狂犬病疫苗中的回收率及其热原含量。结果以不同浓度内毒素标准品刺激HL-60细胞导致细胞分泌IL-6的量计算与内毒素浓度的线性,R^(2)均为0.95以上;计算最低检测限不超过0.125 EU·mL^(-1);以内毒素含量为0.5、1.0 EU·mL^(-1)的溶液做回收实验,考察方法的准确度;通过HL-60-IL-6检测13批冻干人用狂犬病疫苗,内毒素的回收率均在50%~200%;对4批热原检查、内毒素含量测定不合格的冻干人用狂犬病疫苗和附带的3批注射用水,该方法检测结果与家兔热原检查法和内毒素测定法的结果一致。结论以IL-6为检测指标的HL-60单核细胞激活实验适用于冻干人用狂犬病疫苗的热原物质检测。