生育酚结合蛋白基因重组腺相关病毒的制备及抗癌作用

作     者：李小娟 王喻 朱宝益 叶春伟 杨钦泰 黄振华 洪莹芬 文娅 温星桥 LI Xiao-juan;WANG Yu;ZHU Bao-yi;YE Chun-wei;YANG Qin-tai;HUANG Zhen-hua;HONG Ying-fen;WEN Ya;WEN Xing-qiao

作者机构：中山大学附属第三医院预防保健科广州510630 中山大学附属第三医院泌尿外科广州510630 中山大学附属第三医院耳鼻咽喉-头颈外科广州510630 中山大学中山医学院药理学系 中山大学中山医学院 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2011年第28卷第8期

页      面：1363-1366页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：基金项目:国家自然科学基金资助项目(81072115、30901768) 高校基本科研业务费中山大学青年教师培育项目(10ykpy06) 

主　　题：生育酚结合蛋白 重组腺相关病毒 前列腺癌 增殖 

摘      要：目的制备生育酚结合蛋白（TAP）重组腺相关病毒，并探讨其对前列腺癌生长的作用。方法构建重组腺相关病毒质粒pSNAV-TAP-EGFP，酶切、聚合酶链反应（PCR）、测序。225cm2细胞培养瓶中，接种293T细胞，以重组质粒转染。扩增、纯化病毒，并转染DU-145细胞，噻唑蓝（MTT）比色法观察第2、4、6天的细胞增殖。结果成功构建pSNAV—TAP—EGFP质粒，并制备滴度6．4×10^11vg／ml、纯度95％的rAAV2-TAP。该病毒转染DU-145细胞后TAP表达量明显上升。转染后第4天，TAP转染组的细胞吸光度（A值）0．546±0．072，对照组以及空载体转染组的A值分别为0．673±0．015、0．638±0．051，生长明显受到抑制（P〈0．05）。至第6天各组细胞生长差异更显著。结论成功制备高滴度的rAAV—TAP—EGFP病毒，并可抑制前列腺癌细胞的生长。