基于自噬与凋亡机制研究左归丸对化疗损伤颗粒细胞及膜细胞的影响

作     者：刘涛 孙晓峰 曾贵荣 黄欣怡 曾文卓 龚力民 阳松威 刘梦琳 LIU Tao;SUN Xiao-Feng;ZENG Gui-Rong;HUANG Xin-Yi;ZENGWen-Zhuo;GONG Li-Min;YANG Song-Wei;LIU Meng-Lin

作者机构：湖南中医药大学医学院长沙410208 湖南中医药大学医学院组织学与胚胎学教研室长沙410208 湖南省药物安全评价研究中心&新药药效与安全性评价湖南省重点实验室长沙410331 中南大学湘雅三医院心内科长沙410006 湖南中医药大学药学院长沙410208 

出 版 物：《生物化学与生物物理进展》 (Progress In Biochemistry and Biophysics)

年 卷 期：2022年第49卷第9期

页      面：1741-1750页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：supported by grants from The National Natural Science Foundation of China (81774362, 81303004) The Natural Science Foundation of Hunan Province (2018JJ2290) 

主　　题：左归丸 化疗 颗粒细胞 膜细胞 自噬 凋亡 

摘      要：目的探讨左归丸含药血清对化疗损伤性颗粒细胞和膜细胞的影响及作用机制。方法制备左归丸含药血清,培养大鼠卵巢颗粒细胞和膜细胞,使用磷酰胺氮芥造模分组后给药。CCK-8法测定颗粒细胞和膜细胞存活率,实时荧光定量PCR法(RT-PCR)及蛋白质免疫印迹法(Western blot)分别检测卵巢自噬启动因子Beclin-1、微管结合蛋白轻链3(LC3B)、自噬受体蛋白p62、凋亡蛋白Bax、Caspase3在转录水平和翻译水平上的表达。结果10%左归丸含药血清对于细胞存活的挽救率最高。Beclin-1、LC3B、Bax、Caspase3在磷酰胺氮芥作用的颗粒细胞和膜细胞中,相对于空白对照组有高表达(P0.05),10%左归丸含药血清可下调上述蛋白质在模型组中的表达(P0.05);然而受体蛋白p62较空白对照组升高(P0.05),10%左归丸含药血清可上调模型组p62的表达(P0.05)。此外,在颗粒细胞实验组中,激活或抑制自噬途径后,自噬相关蛋白的表达在发生相应改变的同时,凋亡相关蛋白的表达也会发生相应改变。结论磷酰胺氮芥可通过促进凋亡、激活自噬/溶酶体降解途径的机制损伤颗粒细胞和膜细胞。10%左归丸含药血清能缓解由此带来的损伤,同时影响了颗粒细胞和膜细胞自噬和凋亡过程。在磷酰胺氮芥损伤颗粒细胞的过程和10%左归丸含药血清缓解其损伤过程中均存在自噬与凋亡串流(cross-talk)。