下调ANRIL对Kasumi-1细胞增殖和凋亡的影响及其相关作用机制研究

作     者：张成思 许建霞 邓发滑 胡华丽 王斯奇 黄海 韦四喜 ZHANG Cheng-Si;XU Jian-Xia;DENG Fa-Hua;HU Hua-Li;WANG Si-Qi;HUANG Hai;WEI Si-Xi

作者机构：贵州医科大学医学检验学院 贵州省疾病预防控制中心 贵州医科大学附属医院临床检验中心贵州贵阳550004 

出 版 物：《中国实验血液学杂志》 (Journal of Experimental Hematology)

年 卷 期：2022年第30卷第4期

页      面：984-989页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81660027,81960031) 贵州省科技厅基金5779-70 贵州省科技厅基金5610号 贵阳市科技计划项目筑科合同021号。 

主　　题：ANRIL PI3K/AKT 增殖 凋亡 

摘      要：目的:探讨下调ANRIL(Antisense non-coding RNA in the INK4 Locus)表达对Kasumi-1细胞增殖和凋亡的影响及其相关分子机制。方法:使用重组慢病毒构建下调ANRIL表达的Kasumi-1细胞(sh-ANRIL组)及其对照组细胞(sh-NC组),荧光显微镜观察慢病毒对细胞的转染效率,RT-qPCR检测敲低效率及急性髓细胞白血病(AML)患者外周血和骨髓中ANRIL的表达水平。CCK-8法和流式细胞术检测下调ANRIL表达对Kasumi-1细胞增殖和凋亡的影响。Western blot检测下调ANRIL表达后Kasumi-1细胞中PI3K、AKT、p-AKT等相关蛋白分子的表达。结果:ANRIL在AML患者外周血和骨髓中呈高表达;重组慢病毒对Kasumi-1细胞的转染效率90%,敲低效率为70%;CCK-8结果显示,下调Kasumi-1细胞中ANRIL表达能够显著抑制细胞增殖,当DNR作用24、48、72 h,sh-ANRIL组的细胞增殖抑制率分别为(47.40±1.49)%、(69.11±0.51)%和(91.82±1.10)%,均显著高于sh-NC组(40.69±1.70)%(P0.05)、(58.93±1.74)%(P0.01)和(82.93±0.37)%(P0.001);流式细胞术分析显示,sh-ANRIL组细胞凋亡率为(10.29±0.58)%,显著高于sh-NC组的(5.42±0.67)%(P0.01),当DNR作用24 h,sh-ANRIL组细胞凋亡率为(54.41±1.69)%,显著高于sh-NC组的(38.28±1.42)%(P0.001);Western blot结果显示,sh-ANRIL组PI3K、p-AKT、PCNA、BCL-2蛋白水平较sh-NC组显著降低,而BAX蛋白的表达增加。结论:ANRIL可能通过PI3K/AKT信号通路影响Kasumi-1细胞增殖和凋亡,ANRIL是AML的潜在治疗靶点。