加味升降散通过介导RIP1/RIP3/MLKL通路抑制坏死性凋亡减轻糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化

作     者：宋瑞婧 张欣欣 高飞 檀淼 檀金川 SONG Ruijing;ZHANG Xinxin;GAO Fei;TAN Miao;TAN Jinchuan

作者机构：河北中医学院石家庄050200 河北省中医院石家庄050011 河北医科大学第四医院石家庄050000 

出 版 物：《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期：2022年第28卷第17期

页      面：33-42页

核心收录：

学科分类：1006[医学-中西医结合] 1002[医学-临床医学] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：河北省自然科学基金项目(H2019423037)。 

主　　题：加味升降散 糖尿病肾病 坏死性凋亡 炎症 肾间质纤维化 

摘      要：目的:探讨加味升降散基于刺激受体相互作用蛋白(RIP)1/RIP3/混合谱系激酶结构域样假激酶(MLKL)通路对糖尿病肾病大鼠坏死性凋亡及肾纤维化的干预机制。方法:75只SD大鼠分为正常组、模型组、加味升降散低、中、高剂量组(4.365、8.73、17.46 g·kg^(-1))和厄贝沙坦组(0.013 5 g·kg^(-1)),灌胃给药干预4周后,检测各组大鼠24 h尿蛋白定量(UTP),血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平,肾脏病理变化程度;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法和免疫组化分别检测大鼠肾组织中IL-1β、TNF-α、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、核转录因子-κB(NF-κB)mRNA和蛋白表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测RIP1/RIP3/MLKL信号通路关键蛋白的表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠肾脏间质纤维化明显,24 h UTP、IL-1β、TNF-α水平明显升高(P0.05),肾组织中IL-1β、TNF-α、MCP-1、TGF-β1、NF-κB mRNA和蛋白表达水平明显升高(P0.05),RIP1、RIP3、磷酸化(p)-MLKL、MLKL蛋白表达量明显增多(P0.05);与模型组比较,加味升降散各剂量组及厄贝沙坦组大鼠肾脏间质纤维化水平均有不同程度改善,24 h UTP水平均有不同程度降低(P0.05),血清中IL-1β、TNF-α含量明显降低(P0.05),肾组织中IL-1β,TNF-α,MCP-1,TGF-β1,NF-κB mRNA和蛋白表达水平明显下调(P0.05),RIP1、RIP3、p-MLKL、MLKL蛋白表达量明显下调(P0.05)。结论:加味升降散可以改善糖尿病肾病大鼠肾损伤,其机制可能与下调RIP1/RIP3/MLKL信号通路,阻止肾组织坏死性凋亡,抑制肾纤维化有关。