miR-122-5p调节创伤性脑外伤后小胶质细胞极化减弱炎症反应

作     者：康璐璐 龙小兵 王静 吕菁君 Kang Lulu;Long Xiaobing;Wang Jing;Lv Jingjun

作者机构：武汉大学人民医院急诊科武汉430060 

出 版 物：《中华急诊医学杂志》 (Chinese Journal of Emergency Medicine)

年 卷 期：2022年第31卷第8期

页      面：1077-1084页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81372020)。 

主　　题：创伤性脑外伤 脂多糖 小胶质细胞 miR-122-5p M1/M2 神经炎症 NLRP3炎症小体 外泌体 

摘      要：目的探讨miR-122-5p对创伤性脑外伤后小胶质细胞凋亡、极化和炎症反应的影响。方法建立创伤性脑外伤(traumatic brain injury,TBI)小鼠模型和细胞模型。使用TBI小鼠脑匀浆刺激星型胶质细胞产生外泌体,microRNA微阵列分析外泌体中显著改变的microRNA。实时荧光定量PCR检测TBI小鼠模型和TBI细胞模型中miR-122-5p表达。使用TUNEL凋亡染色、免疫荧光共聚焦、蛋白质印迹研究miR-122-5p抑制剂在TBI神经炎症中对小胶质细胞凋亡、小胶质细胞M1/M2表型转化、NLRP3通路及NFκB磷酸化的作用。结果通过microRNA微阵列分析发现有83个下调miRNA(改变2倍以上,P0.05),其中miR-122-5p显著下调(P0.01),miR-122-5p在TBI小鼠及细胞模型中表达显著下降[(1.0±0.00)vs.(0.41±0.15),P0.001];[(1.0±0.00)vs.(0.34±0.07),P0.001]。TUNEL凋亡检测、免疫荧光染色结果表明抑制miR-122-5p表达,可以显著减轻LPS诱导的小胶质细胞凋亡[(8.03±1.30)vs.(3.17±0.34),P0.001],促进小胶质细胞M1向M2表型转化,即M1表型极化减少[(56.96±13.70)vs.(34.70±3.47),P=0.002],M2表型极化增加[(30.46±3.67)vs.(40.74±2.49),P=0.005]。蛋白质印迹结果表明miR-122-5p抑制剂降低NLRP3炎症小体活化[(0.77±0.10)vs.(0.51±0.11),P=0.02],降低NFκB的磷酸化[(0.73±0.08)vs.(0.50±0.07),P=0.003]。结论miR-122-5p在TBI星形胶质细胞分泌的外泌体及小胶质细胞中表达下调,miR-122-5p抑制剂可以通过抑制TBI后NLRP3炎症小体通路的活化及NFκB的磷酸化,促进小胶质细胞M1向M2表型转化,减少小胶质细胞凋亡,从而减轻TBI后小胶质细胞炎症损伤。