嗜水气单胞菌β-hemA重组菌的优化培养及其生长曲线的测定

作     者：方勤美 林天龙 龚晖 陈红燕 陈日升 欧阳岁东 

作者机构：福建省农科院畜牧兽医研究所福州350012 

出 版 物：《中国人兽共患病杂志》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期：2004年第20卷第4期

页      面：334-336页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：国家 8 63资助 ( 2 0 0 1AA62 2 0 5 0 ) 福建省科委资助( 2 0 0 0Z0 77) 

主　　题：嗜水气单胞菌 β-hemA 重组菌 优化培养 生长曲线 测定 

摘      要：用正交试验探讨温度、培养基、时间三个因素对嗜水气单胞菌 β -hemA重组菌E coliDH5α(PCB)基因产物表达量的影响 ,通过优化培养 ,选择最佳培养条件 ,显著提高了 β溶血素基因 (β-hemolysisgene ,β -hemA)产物的产量。实验结果表明 :该重组菌株在 10 0mlTSB(添加 0 0 5 %酵母浸提物 ,1 8μg/mlZncl2 ) ,37℃培养 30h收获 ,其毒素蛋白含量为 32 5 8μg ,毒素溶血价为 17 4 4hu/ μg ,而在LB(10 0ml)和营养内汤 (10 0ml)中最高蛋白量和溶血活性分别为 12 6 0 μg ,14hu/ μg和 1199μg ,8 2 2hu/ μg。所选择的三个因子中对毒素蛋白质含量影响最大的是培养基 ,其次是温度 ;而对溶血素影响最大的则是温度 ,其次为时间。最佳生长曲线测定结果表明 ,在培养基预热至 37℃的情况下 ,PCB 6h能进入对数期。