杆状病毒凋亡抑制基因IAP1促进家蚕CyclinB的核内积累

作     者：肖苗 董战旗 肖琴 胡志刚 王杰 陈鹏 潘敏慧 XIAO Miao;DONG Zhanqi;XIAO Qin;HU Zhigang;WANG Jie;CHEN Peng;PAN Minhui

作者机构：西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室重庆400715 西南大学农业部蚕桑生物学与遗传育种重点实验室重庆400715 

出 版 物：《微生物学报》 (Acta Microbiologica Sinica)

年 卷 期：2022年第62卷第9期

页      面：3478-3488页

核心收录：

学科分类：0906[农学-兽医学] 09[农学] 

基　　金：国家自然科学基金(31872427,31902214) 重庆市自然科学基金(cstc2019jcyj-msxm X0096,cstc2020jscx-msxm X0045) 财政部和农业农村部:国家现代农业产业技术体系 

主　　题：家蚕 家蚕核型多角体病毒 细胞周期 细胞周期蛋白B 凋亡抑制蛋白1 

摘      要：【目的】家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)是生产上危害最严重的病原之一。BmNPV感染Bm N-SWU1细胞将细胞周期阻滞于G2/M期。CyclinB是调控细胞周期G2期向M期转换的重要细胞周期蛋白。因此,研究BmNPV感染后CyclinB变化对解析病毒调控细胞周期的机制具有重要意义,同时探究这个过程中与CyclinB互作的病毒蛋白,可为构建家蚕转基因品系提供分子靶标。【方法】q RT-PCR检测BmNPV感染后BmCyclinB的表达变化;免疫荧光观察病毒感染前后BmCyclinB的定位变化,通过细胞质细胞核蛋白分离实验验证。免疫共沉淀钓取与BmCyclinB互作的病毒蛋白。BmNPV感染期间敲除BmNPV IAP1观察BmCyclinB的入核比例。【结果】BmNPV感染后BmCyclinB转录水平下调。BmNPV感染前BmCyclinB主要定位于细胞质,而感染后主要定位于细胞核。BmNPV感染Bm N-SWU1细胞后促进BmCyclinB在核内积累。共钓取了7个与BmCyclinB互作的病毒蛋白,免疫共沉淀和细胞共定位证明BmNPV IAP1与BmCyclinB之间存在相互作用。敲除BmNPV IAP1后BmCyclinB进入细胞核的数量显著减少。【结论】BmNPV IAP1可通过与BmCyclinB互作,促进BmCyclinB在核内积累。