VPS28通过泛素化信号通路调控奶牛乳腺上皮细胞中乳蛋白的合成

作     者：任宇 燕文荃 丁玥竹 扈孟雪 周杰珑 吴培福 陈粉粉 刘莉莉 REN Yu;YAN Wenquan;DING Yuezhu;HU Mengxue;ZHOU Jielong;WU Peifu;CHEN Fenfen;LIU Lili

作者机构：西南林业大学生命科学学院昆明650224 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2022年第53卷第8期

页      面：2558-2567页

核心收录：

学科分类：0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

基　　金：国家自然科学基金(31902152) 云南省教育厅科学研究基金研究生项目(2021Y267) 云南省教育厅科学研究基金教师项目(2018JS333) 西南林业大学博士科研启动基金(112119) 云南省科技厅基础研究项目(2019FD06)。 

主　　题：VPS28 乳蛋白 泛素化 RNAi iTRAQ 

摘      要：旨在分析VPS28基因调控乳蛋白合成的分子机制,为奶牛泌乳性状的分子育种奠定理论基础。本研究首先利用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术敲降奶牛原代乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMECs)中VPS28基因的表达水平,检测与乳蛋白合成、泛素化-溶酶体和泛素化-蛋白酶体通路相关的11个基因、泛素蛋白的表达水平及蛋白酶体活性;然后抑制BMECs中蛋白酶体和溶酶体的活性,检测酪蛋白相关基因、核糖体蛋白的表达水平;最后利用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ)比较蛋白质组学分析敲降前后BMECs的差异表达蛋白。结果表明,敲降VPS28基因后,CSN1S1、CSN2、CSN3、RPS8、UBC、PSMC3、PSMC5基因均显著上调,PSMD12显著下调;抑制蛋白酶体后,CSN1S1、CSN2、CSN3显著上调,RPL13显著下调;抑制溶酶体活性后酪蛋白相关基因表达不显著;iTRAQ结果共筛选出129个差异表达蛋白,下调蛋白主要富集在核糖体、溶酶体、剪切体等相关通路,上调蛋白主要富集在内质网的蛋白质加工、加压素调控的水重吸收过程、RNA转运等通路中。研究表明,VPS28基因可通过泛素化信号通路影响BMECs中乳蛋白的合成。