Per2蛋白抑制β_(1)-肾上腺素受体自身抗体诱导的心肌细胞死亡

作     者：李朋佳 贾微微 陆洁蓓 马明霞 周秀雅 王宁 原媛 郭蕊 牛晓辰 王晓晖 王丽 LI Pengjia;JIA Weiwei;LU Jiebei;MA Mingxia;ZHOU Xiuya;WANG Ning;YUAN Yuan;GUO Rui;NIUXiaochen;WANG Xiaohui;WANG Li

作者机构：山西医科大学基础医学院基础医学研究中心太原030001 山西医科大学基础医学院形态学实验室太原030001 山西医科大学附属人民医院太原030012 

出 版 物：《陆军军医大学学报》 (Journal of Army Medical University)

年 卷 期：2022年第44卷第9期

页      面：898-905页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(31871177) 山西省研究生教育创新项目(2021Y409) 

主　　题：心肌细胞 β_(1)-肾上腺素受体自身抗体 Per2 昼夜节律 细胞死亡 

摘      要：目的探讨周期蛋白2(period 2,Per2)在β_(1)-肾上腺素受体(β_(1)-adrenergic receptor,β_(1)-AR)自身抗体(β_(1)-adrenergic receptor autoantibodies,β_(1)-AA)诱导的心肌细胞死亡中的作用。方法选取6~8周龄SD雄性大鼠16只随机分为主动免疫组[模型组,采用β_(1)-肾上腺素受体细胞外第二环抗原肽段(β_(1)-AR-ECⅡ)对大鼠进行主动免疫]和对照组(同期注射Na_(2)CO_(3)等溶液),每组8只。8周时取大鼠血清,提纯β_(1)-AA。购买H9c2心肌细胞,随机分为Control组、β_(1)-AA组和β_(1)-AR+β_(1)-AA组,CCK-8法检测细胞存活率(n=8);Control组和β_(1)-AA(1μmol/L)组细胞经地塞米松同步化4 h后,Western blot检测两组不同时间点心肌细胞Per2的表达,JTK_CYCLE分析昼夜节律参数(n=11);分别采用慢病毒shPer2和Per2敲低或过表达心肌细胞中Per2的表达,RT-PCR和Western blot检测Per2的表达(n=6);在慢病毒敲低Per2(n=8)和过表达Per2(n=10)基础上,结合β_(1)-AA处理,CCK-8法检测心肌细胞存活率。结果CCK-8结果显示,β_(1)-AA诱导H9c2细胞存活率明显降低(P0.05),其中CT8和CT16降低最为明显(P0.01)。慢病毒敲低Per2表达可引起心肌细胞存活率降低;在此基础上进行β_(1)-AA处理,细胞存活率进一步降低(P0.001)。而过表达Per2可明显逆转β_(1)-AA诱导的心肌细胞存活率下降(P0.001)。结论Per2抑制β_(1)-AA诱导的H9c2心肌细胞死亡。