牦牛多杀性巴氏杆菌烈性噬菌体的生物学特性与全基因组序列分析

作     者：魏歆 马凯茹 赵猛 闫艳新 孙虎芝 潘强 桂林生 张红见 任慧英 赵静 WEI Xin;MA Kai-ru;ZHAO Meng;YAN Yan-xin;SUN Hu-zhi;PAN Qiang;GUI Lin-sheng;ZHANG Hong-jian;REN Hui-ying;ZHAO Jing

作者机构：青海大学农牧学院青海西宁810016 青岛诺安百特生物技术有限公司山东青岛266109 青岛农业大学动物医学院山东青岛266109 

出 版 物：《中国兽医杂志》 (Chinese Journal of Veterinary Medicine)

年 卷 期：2022年第58卷第5期

页      面：39-45页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：青海省科技厅科技国际合作项目(2020-HZ-801,2021-HZ-803) 青海省农业农村厅项目(NMSY-2020-02,NMSY-2020-03) 

主　　题：多杀性巴氏杆菌 噬菌体 分离鉴定 全基因组分析 牦牛 

摘      要：为了鉴定1株防治牦牛出血性败血症的噬菌体,并评价其开发为新型环保生物制剂的潜力,本试验用双层平板法从牦牛的粪便污水中分离获得1株新型的B型牦牛多杀性巴氏杆菌噬菌体vB_PmuP_Pa7(简称Pa7),并使用透射电镜观察其形态,同时对噬菌体进行热稳定性、pH、最佳感染复数(MOI)、一步生长曲线和裂解谱等生物学特性分析,采用Illumina测序技术进行全基因组测序。结果显示:Pa7有1个正廿多面体头部(直径约55 nm)和1个短尾(直径约20 nm),属于短尾噬菌体科;Pa7能耐受一定的高温,60℃以上不稳定;Pa7在pH 5.0~9.0活性较为稳定;Pa7的最佳感染复数(MOI)为0.01;一步生长曲线试验结果显示,Pa7潜伏期大约持续20 min,平均裂解量为162 PFU/cell;Pa7裂解谱很窄,仅能裂解B型多杀性巴氏杆菌;基因测序结果显示,Pa7基因组为双链DNA,基因组大小长度为37402 bp,G+C含量40.9%,拥有41个开放阅读框(ORFs),基因组无耐药性因子,未检测到tRNA基因。结果表明,噬菌体Pa7为1株多杀性巴氏杆菌烈性噬菌体,具有开发为抗多杀性巴氏杆菌制剂的潜力。