基于CRISPR/Cas12b的乳粉中克罗诺杆菌属检测

作     者：张懿翔 张清平 李林显 王亮 杨捷琳 刘洋 Zhang Yixiang;Zhang Qingping;Li Linxian;Wang Liang;Yang Jielin;Liu Yang

作者机构：上海市质量监督检验技术研究院/国家市场监管重点实验室(乳及乳制品检测与监控技术)上海200233 吐露港生物科技有限公司上海200233 上海海关动植物与食品检验检疫技术中心上海200135 

出 版 物：《中国食品学报》 (Journal of Chinese Institute Of Food Science and Technology)

年 卷 期：2022年第22卷第6期

页      面：267-275页

核心收录：

学科分类：0832[工学-食品科学与工程（可授工学、农学学位）] 08[工学] 083203[工学-农产品加工及贮藏工程] 

基　　金：国家市场监督管理总局技术保障专项项目(2019YJ018) 

主　　题：CRISPR Cas12b 克罗诺杆菌属 检测 

摘      要：目的:开发一种基于CRISPR/Cas12b的克罗诺杆菌属分子检测方法。方法:以克罗诺杆菌菌属特异性基因序列为候选区域,针对区域设计扩增引物和向导RNA靶向序列,对其进行条件优化、特异性检测、反应体系优化,并用人工污染样品对体系的灵敏度、重复性进行验证。结果:该方法的特异性很好,方法的灵敏度达0.01 ng/μL,在人工污染样品中可检测到初始菌量10 CFU/g的样品,方法检出限10 CFU/100 g。对市售的51份乳粉样品进行检测,结果与传统国标方法一致。结论:建立的CRISPR/Cas12b方法可用于乳粉中克罗诺杆菌属的快速检测。