菲牛蛭抗凝提取物活性成分的研究

作     者：李阳 顾福根 郭桃桃 卢天才 许维岸 韩宏岩 

作者机构：苏州大学基础医学与生物科学学院江苏苏州215123 广西复鑫益生物科技有限公司广西平南537300 

出 版 物：《中药材》 (Journal of Chinese Medicinal Materials)

年 卷 期：2021年第44卷第12期

页      面：2850-2855页

学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81071306) 江苏省高校优势学科建设工程资助项目(PAPD) 

主　　题：水蛭 菲牛蛭 抗凝提取物 活性成分 蛋白质组 

摘      要：目的:全面了解菲牛蛭抗凝活性提取物蛋白质生物活性成分和功能。方法:比较了30%~80%饱和度硫酸铵沉淀法、20%~60%乙醇沉淀法和60%丙酮联合等电点沉淀法分离纯化菲牛蛭抗凝活性物质的方法;采用Nano LC-MS/MS结合生物信息学分析鉴定提取物的蛋白质成分;对提取物进行了体外抗凝溶栓和细胞毒性的功能研究。结果:3种方法抗凝回收率分别为83%、66%和64%。三种方法提取物冻干粉颜色均较浅,无强烈腥臭味。硫酸铵沉淀法得到的冻干粉完全水溶,乙醇和丙酮法有少量不溶。从提取物冻干粉中共鉴定出397种蛋白质,其中生物活性物质除了含有水蛭素,还含有多种生物活性蛋白;冻干粉能延长血浆复钙时间PRT、凝血酶时间TT和凝血酶原时间PT;有体外溶栓效果;不影响正常的星形胶质细胞增殖,可呈浓度依赖性抑制胶质瘤细胞的生长增殖。结论:该研究建立了充分提取活体菲牛蛭抗凝活性物质的方法,抗凝提取物中含有多种具有潜在药用价值的蛋白质成分。该研究对菲牛蛭的应用奠定了基础。