波卓霉素生物合成基因簇的异源表达及产量提高

作     者：周威 张学文 庄以彬 刘晓楠 殷华 郁彭 刘涛 ZHOU Wei;ZHANG Xue-wen;ZHUANG Yi-bin;LIU Xiao-nan;YIN Hua;YU Peng;LIU Tao

作者机构：天津科技大学生物工程学院天津300457 中国科学院天津工业生物技术研究所天津300308 

出 版 物：《华中农业大学学报》 (Journal of Huazhong Agricultural University)

年 卷 期：2015年第34卷第1期

页      面：49-58页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家"973"项目(2012CB721100) 天津市科技支撑计划重点项目(11ZCKFSY07900) 

主　　题：波卓链霉菌 波卓霉素 基因组文库 异源表达 启动子替换 

摘      要：波卓霉素是从波卓链霉菌(Streptomyces bottropensis)中分离得到的,具有抗革兰氏阳性菌及支原体的生物活性,尤其重要的是对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和抗万古霉素肠球菌有抑菌活性。试验通过构建基因组文库,PCR筛选获得包含完整波卓霉素合成基因簇的柯斯质粒4E11,通过接合转移的方法把4E11转化至天蓝色链霉菌M145中,对获得的异源表达株M145/4E11进行发酵,通过提取纯化和HPLC-MS检测,表明M145/4E11发酵液中产生了波卓霉素;试验并通过Red/ET重组系统,以红霉素启动子(ermE*P1)替换了波卓霉素生物合成簇抗性基因btmA和前提肽合成基因btmD的启动子,成功实现异源表达株M145/4E11波卓霉素的产量提高。