积雪草酸通过活性氧诱导乳腺癌4T1细胞凋亡的机制研究

作     者：杨兴旺 田苗苗 马春宇 YANG Xingwang;TIAN Miaomiao;MA Chunyu

作者机构：锦州医科大学附属第一医院辽宁锦州121000 

出 版 物：《中药新药与临床药理》 (Traditional Chinese Drug Research and Clinical Pharmacology)

年 卷 期：2022年第33卷第6期

页      面：770-776页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：辽宁省自然科学基金项目(20170540368) 

主　　题：积雪草酸 乳腺癌4T1细胞 活性氧 凋亡 

摘      要：目的探讨积雪草酸(Asiatic acid,AA)通过活性氧(ROS)对乳腺癌4T1细胞凋亡的影响及相关机制。方法通过MTT法和集落形成法检测不同浓度AA对4T1细胞增殖作用的影响;采用JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位变化;Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡情况;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;DCFH-DA探针法检测细胞ROS水平;RT-PCR法检测4T1细胞Bax、Caspase3、Bcl-2及细胞色素C(Cytochrome C)mRNA表达水平;Western Blot法检测4T1细胞Bax、cleaved-Caspase3、Bcl-2及Cytochrome C蛋白的表达。结果10~100μmol·L^(-1)AA呈浓度依赖性地抑制4T1细胞增殖(P0.01),其作用24 h的IC_(50)值为41.01μmol·L^(-1)。与对照组比较,AA组的细胞集落形成能力显著下降(P0.01);红/绿相对荧光强度(线粒体膜电位)显著降低(P0.01);亮蓝色荧光强度(凋亡细胞数量)显著增加(P0.01);细胞凋亡率显著升高(P0.01);ROS水平显著升高(P0.01);Bcl-2 mRNA表达显著下调(P0.01),Bax、Caspase3、Cytochrome C mRNA表达明显上调(P0.05,P0.01);Bcl-2蛋白表达显著下调(P0.01),Bax、cleaved-Caspase3、Cytochrome C蛋白表达显著上调(P0.01)。AA与抗氧化剂NAC联用后,能够逆转AA对4T1细胞凋亡及凋亡相关蛋白的作用。结论AA能够促进乳腺癌4T1细胞内ROS水平升高,诱导4T1细胞凋亡。