miR-301a-3p靶向MDM4调控肝癌细胞凋亡的机制

作     者：倪淑斌 张建勋 徐星 金翌 杨静 NI Shu-bin;ZHANG Jian-xun;XU Xing;JIN Yi;YANG Jing

作者机构：上海中医药大学附属第七人民医院肝胆外科上海200137 

出 版 物：《生物技术》 (Biotechnology)

年 卷 期：2022年第32卷第3期

页      面：332-337页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：上海中医药大学附属第七医院人才培养计划(BDX2022) 上海中医药大学“研究生创新培养专项”(Y2021045) 

主　　题：miR-301a-3p MDM4 肝癌 凋亡 顺铂 HepG2 

摘      要：[目的]探讨化疗药物诱导肝癌细胞凋亡的潜在机制。[方法]高通量测序检测顺铂处理后肝癌细胞HepG2的失调miRNA。过表达失调miRNA后,检测HepG2的凋亡水平。miRDB在线分析和RNAi筛选鉴定miRNA的潜在底物。[结果]顺铂处理后,HepG2的凋亡水平上升(18.23±3.01 vs 74.97±11.25,t=8.564,P0.05)。过表达miR-301a-3p时,HepG2的凋亡水平上升(16.40±7.97 vs 56.12±9.37,t=5.590,P0.05)。敲低miR-301a-3p时,HepG2的凋亡水平下降(21.34±3.34 vs 6.78±1.11,t=7.165,P0.05)。敲低MDM4时,HepG2的凋亡水平上升(16.80±7.88 vs 72.85±10.70,t=7.302,P0.05)。过表达MDM4时,HepG2的凋亡水平下降(19.11±5.02 vs 6.04±1.02,t=4.432,P0.05)。过表达miR-301a-3p时,MDM4的mRNA水平和蛋白水平均下降(0.58±0.04 vs 0.11±0.01,t=19.74,P0.05);而敲低miR-301a-3p时,MDM4的mRNA水平和蛋白水平均上升(0.58±0.04 vs 1.11±0.23,t=3.932,P0.05)。肝癌组织中miR-301a-3p的表达水平显著低于癌旁组织(0.65±0.25 vs 0.40±0.04,t=5.949,P0.05)。肝癌组织中MDM4的表达水平显著高于癌旁组织(0.036±0.025 vs 0.062±0.003,t=6.550,P0.05)。同时,肝癌组织中miR-301a-3p和MDM4的表达水平呈现负相关(ρ=-0.385,P0.05)。[结论]顺铂诱导肝癌细胞miR-301a-3p表达上调,miR-301a-3p通过靶向MDM4 mRNA的3’端非编码区,降解了MDM4 mRNA,减少了MDM4的蛋白表达,最终促进了肝癌细胞的凋亡。