舒芬太尼对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及其作用机制

作     者：赵智慧 白香花 何金玲 段伟琴 刘敏 张生茂 ZHAO Zhihui;BAI Xianghua;HE Jinling;DUAN Weiqin;LIU Min;ZHANG Shengmao

作者机构：内蒙古自治区人民医院麻醉科内蒙古呼和浩特010017 

出 版 物：《吉林大学学报（医学版）》 (Journal of Jilin University：Medicine Edition)

年 卷 期：2022年第48卷第2期

页      面：364-373页

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：内蒙古自治区科技厅科技计划项目(201702118)。 

主　　题：舒芬太尼 缺血再灌注损伤 长链非编码RNA 肺癌转移相关转录本1 细胞凋亡 细胞外信号调节蛋白激酶1 细胞外信号调节蛋白激酶2 

摘      要：目的:探讨舒芬太尼对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌细胞凋亡及长链非编码RNA(LncRNA)-肺癌转移相关转录本1(MALAT1)靶向细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)信号通路的影响,阐明舒芬太尼对MIRI大鼠的可能作用机制。方法:30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和舒芬太尼组,每组10只。采用结扎左冠状动脉前降支(LAD)的方法制备MIRI模型,假手术组只开胸不结扎,舒芬太尼组大鼠于再灌注前10 min时尾静脉注射舒芬太尼1μg·kg^(-1),假手术组和模型组大鼠分别尾静脉注射等量生理盐水。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法及荧光探针原位杂交(FISH)法检测各组大鼠心肌组织中LncRNA-MALAT1表达水平,原位末端标记(TUNEL)染色法检测各组大鼠心肌细胞凋亡率,Western blotting法检测各组大鼠心肌组织中半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、活化半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved-caspase-3)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、ERK1/2和磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白表达水平。构建心肌细胞缺氧复氧模型模拟体内MIRI,分为对照组、模型组、舒芬太尼组、pcDNA-MALAT1组(MALAT1组)和舒芬太尼+pcDNA-MALAT1组(舒芬太尼+MALAT1组)。H9C2细胞缺氧培养10 h后复氧构建缺氧复氧损伤模型;采用Western blotting法检测各组H9C2细胞中caspase-3、cleaved-caspase-3、Bax、Bcl-2、ERK1/2和p-ERK1/2蛋白表达水平。结果:动物实验,与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织中LncRNA-MALAT1表达水平、心肌细胞凋亡率、cleaved-caspase-3蛋白表达水平和Bax/Bcl-2比值均明显升高(P0.05),p-ERK1/2蛋白表达水平明显降低(P0.05);与模型组比较,舒芬太尼组大鼠心肌组织中LncRNA-MALAT1表达水平、心肌细胞凋亡率、cleaved-caspase-3蛋白表达水平和Bax/Bcl-2比值均明显降低(P0.05),p-ERK1/2蛋白表达水平明显升高(P0.05)。细胞实验,与对照组比较,模型组H9C2细胞中cleaved-caspase-3蛋白表达水平和Bax/Bcl-2比值明显升高(P0.05),p-ERK1/2蛋白表达水平明显降低(P0.05);与模型组比较,舒芬太尼组H9C2细胞中cleaved-caspase-3蛋白表达水平和Bax/Bcl-2比值明显降低(P0.05),p-ERK1/2蛋白表达水平明显升高(P0.05);与MALAT1组比较,舒芬太尼+MALAT1组H9C2细胞中cleaved-caspase-3蛋白表达水平和Bax/Bcl-2比值明显降低(P0.05),p-ERK1/2蛋白表达水平明显升高(P0.05)。结论:舒芬太尼能减轻MIRI大鼠心肌细胞凋亡,其作用机制可能与抑制LncRNA-MALAT1表达从而激活ERK1/2信号通路有关。