NATD/FOXA2信号通路对乳腺癌转移的作用及其机制

作     者：肖红艳 方芳 顾林 XIAO Hong-yan;FANG Fang;GU Lin

作者机构：天津医科大学肿瘤医院乳腺二科国家肿瘤临床医学研究中心天津市肿瘤防治重点实验室天津市恶性肿瘤临床医学研究中心乳腺癌防治教育部重点实验室天津300060 

出 版 物：《中国病理生理杂志》 (Chinese Journal of Pathophysiology)

年 卷 期：2022年第38卷第4期

页      面：636-644页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：天津市医学科研基金立项项目(No.20190062) 

主　　题：N-乙酰基转移酶40 叉头框蛋白A2 乳腺癌 肿瘤转移 上皮-间充质转化 

摘      要：目的:基于N-α-乙酰基转移酶D(NATD)/叉头框蛋白A2(FOXA2)信号通路探讨其对乳腺癌转移的作用机制。方法:对不同转移能力的乳腺癌细胞系(人细胞系MDA-MB-231及其对肺转移衍生物LM2、MCF10CA1h及其转移性等基因系MCF10CA1a)进行了质谱组学分析。构建NATD过表达和敲减的MDA-MB-231和LM2细胞模型,并通过尾静脉注射到小鼠体内。在不同时点使用生物发光成像测量了肺转移负担。通过高通量反相蛋白质阵列和RNA免疫沉淀测序(RIP-Seq)分析鉴定NATD靶标。对于救援实验,MDA-MB-231细胞与FOXA2和NATD过表达质粒体共转染48 h。通过Transwell测定评估细胞侵袭和迁移。分别进行免疫荧光或Western blot测定NATD和上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白表达。结果:质谱组学分析确定NATD是受调控的蛋白质之一,并且Western blot证实了NATD蛋白在LM2和MCF10CA1a转移癌细胞中的表达高于MDA-MB-231和MCF10CA1h亲本癌细胞。NATD过表达MDA-MB-231细胞显著加剧了小鼠肺转移负担并缩短了动物的存活期;相比之下,NATD敲减LM2细胞减少了小鼠的肺定植并延长了无转移生存期。通过高通量反相蛋白质阵列和RIP-Seq分析鉴定FOXA2作为NATD靶标。在NATD过表达的MDA-MB-231细胞中,FOXA2表达明显降低。NATD过表达介导的对MDA-MB-231细胞侵袭和迁移的促进作用被FOXA2过表达逆转。此外,免疫荧光和Western blot分析显示,NATD过表达介导MDA-MB-231细胞的EMT过程,而FOXA2过表达逆转了NATD对EMT过程的诱导作用。结论:NATD通过控制FOXA2介导的EMT来促进乳腺癌转移。因此,靶向NATD/FOXA2轴可能是治疗乳腺癌的新策略。