一种高通量筛选PAC_1受体激动剂的细胞模型的建立

作     者：张素行 蔡绍皙 许治良 ZHANG Su-xing;CAI Shao-xi;XU Zhi-liang

作者机构：华东师范大学教育部脑功能基因组学重点实验室 重庆大学教育部生物力学和组织工程重点实验室 重庆大学教育部生物力学和组织工程重点实验室重庆400044 

出 版 物：《第三军医大学学报》 (Journal of Third Military Medical University)

年 卷 期：2006年第28卷第16期

页      面：1644-1647页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 

基　　金：国家"863"计划项目(2003AA221061)~~ 

主　　题：PAC1-R 报告基因 激动剂 高通量药物筛选 

摘      要：目的建立垂体腺苷酸环化酶激活肽Ⅰ型受体(pituitaryadenylatecyclaseactivatingpeptideⅠreceptor,PAC1-R)激动剂的高通量筛选模型,筛选PAC1-R受体的激动剂,开发用于治疗神经系统疾病和能量代谢疾病的药物。方法将人的PAC1-RcDNA克隆到哺乳动物细胞表达载体pCDNA3.1构成质粒hPAC1R/pCDNA3.1,将这种质粒与报告基因质粒(SRE/3×MRE/CRE/VIP/Luci)共转染到CHO细胞,通过G418筛选,建立稳定细胞株,利用PAC1-R内源激动剂PACAP-27探索和优化了筛选条件。结果建立了稳定表达hPAC1-R的筛选细胞株和可靠的筛选方法,Z’因子大于0.7。结论该系统成功适合于PAC1-R激动剂的高通量筛选。