miRNA作为血小板储存损伤标志物研究初探

作     者：杨惠宽 吴千羽 张嘉仪 陈小洁 苑召虎 魏亚明 YANG Hui-kuan;WU Qian-yu;ZHANG Jia-yi

作者机构：广州市第一人民医院输血科广东省精准输血技术工程研究中心510180 

出 版 物：《临床输血与检验》 (Journal of Clinical Transfusion and Laboratory Medicine)

年 卷 期：2022年第24卷第2期

页      面：176-181页

学科分类：1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：广州市科技计划项目(No.201904010027、202002030427) 广州市临床重大项目(No.2019ZD18)资助。 

主　　题：血小板 微小RNA 储存损伤 凋亡 GPⅡb/Ⅲa 血管舒张刺激磷酸蛋白 P2Y12 

摘      要：目的探讨血小板(PLT)储存过程中microRNA(miRNA)的表达变化,PLT功能相关蛋白表达情况,以及与PLT聚集功能的关系。方法采集机采PLT于(22±2)℃下震荡保存,使用miRNA表达谱芯片检测PLT内miRNA表达及变化。实时荧光定量PCR(qPCR)检测机采PLT储存过程中与聚集功能相关的miRNA表达变化。流式细胞术(FCM)检测PLT凋亡率、PLT内VASP、P2Y12和GPⅡb/Ⅲa。结果对比储存第2天与第5天PLT miRNA表达结果,47种miRNA表达上调,120种下调。储存第8天与第2天相比,28种表达上调,202种下调。变化的miRNA的靶基因主要与PLT脱粒、激活及血小板生长因子(PDGF)受体信号通路有关。其中储存第5天时PLT聚集相关的miR-155、miR-21-5p和miR-21-3p表达下调(P0.05),而let-7b、miR-223和miR-3162表达上调(P0.05)。在(22±2)℃条件下保存的PLT凋亡率随储存天数增加逐步升高。在储存过程中,P2Y12活化程度增高,导致VASP去磷酸化增加,而GPⅡb/Ⅲa含量则在储存的过程中相对稳定。结论大量的miRNA存在于PLT中,且表达量随着PLT保存时间增加而发生变化。这些miRNA的表达变化能影响相应的蛋白水平并最终导致PLT的聚集功能和凋亡发生变化,特定miRNA表达变化具有作为PLT储存损伤的生物学标记可能。