隔山消的指纹图谱建立、化学模式识别分析及多指标含量测定

作     者：孙佳 勾健 秦兰 刘亭 潘洁 韦宇 刘春花 SUN Jia;GOU Jian;QIN Lan;LIU Ting;PAN Jie;WEI Yu;LIU Chunhua

作者机构：贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550004 贵州医科大学药学院贵阳550004 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵阳550004 

出 版 物：《中国药房》 (China Pharmacy)

年 卷 期：2022年第33卷第6期

页      面：673-679页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.81760700) 贵州省中医药管理局中医药、民族医药科学技术研究课题(No.QZYY-2021-087) 贵州医科大学博士启动基金项目(No.校博合J字013号) 

主　　题：隔山消 高效液相色谱法 指纹图谱 化学模式识别分析 含量测定 

摘      要：目的建立隔山消药材的指纹图谱并进行化学模式识别分析,同时测定其中4种成分的含量。方法采用高效液相色谱(HPLC)法。色谱柱为ACE UExcel C_(18),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.2 mL/min,检测波长为210 nm,柱温为40℃,进样量为10μL。以青阳参苷元为参照,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》绘制16批隔山消药材的HPLC指纹图谱并进行相似度评价,确定共有峰。采用SPSS 26.0软件和SIMCA 14.0软件进行聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘-判别分析,以变量重要性投影(VIP)值大于1为标准筛选影响隔山消药材质量的差异性成分;采用相同的HPLC法测定丁香酸、去酰基萝藦苷元、白首乌二苯酮和青阳参苷元的含量。结果16批隔山消药材中共有29个共有峰,相似度为0.723~0.998;共指认了4个共有峰,分别为丁香酸(7号峰)、去酰基萝藦苷元(9号峰)、白首乌二苯酮(13号峰)、青阳参苷元(15号峰)。聚类分析结果显示,16批隔山消药材可聚为3类,其中S1为一类,S3为一类,S2、S4~S16为一类。主成分分析结果显示,5个主成分的累计方差贡献率为88.706%,分类结果与聚类分析结果一致。正交偏最小二乘-判别分析结果显示,VIP值大于1的共有峰由大到小依次为20号峰、10号峰、25号峰、12号峰、15号峰(青阳参苷元)、21号峰、14号峰、16号峰、26号峰、22号峰、17号峰。丁香酸、去酰基萝藦苷元、白首乌二苯酮和青阳参苷元检测质量浓度的线性范围分别为0.7153~45.7780、2.3794~152.2810、0.6420~41.0850、14.5416~930.6620μg/mL(R^(2)均大于0.999);定量限分别为0.3577、0.4759、0.6420、2.4236μg/mL,检测限分别为0.1460、0.1641、0.2488、0.8333μg/mL;精密度、重复性、稳定性(24 h)试验的RSD均小于3%;平均加样回收率分别为99.11%(RSD=2.00%,n=9)、98.54%(RSD=2.21%,n=9)、96.33%(RSD=2.54%,n=9)、95.96%(RSD=2.93%,n=9);含量分别为17.12~147.80、95.23~583.10(S8低于定量限)、16.91~210.88、211.68~3587.15(S1低于定量限)μg/g。结论所建HPLC指纹图谱和含量测定方法稳定、可靠、准确度高且重复性好,结合化学模式识别分析可用于隔山消药材的质量控制。