环状RNA hsa_circ_0067582对胃癌细胞增殖及侵袭能力的影响

作     者：陆蓉丹 黄哲 陆佳敏 张海强 邵永富 LU Rongdan;HUANG Zhe;LU Jiamin;ZHANG Haiqiang;SHAO Yongfu

作者机构：宁波大学医学院附属医院消化内科浙江宁波315020 宁波大学医学院附属医院急诊科浙江宁波315020 宁波大学医学院附属医院胃肠外科浙江宁波315020 

出 版 物：《中国医学科学院学报》 (Acta Academiae Medicinae Sinicae)

年 卷 期：2022年第44卷第1期

页      面：81-90页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：宁波市自然科学基金项目(2019A610327) 浙江省医药卫生科技项目(2018KY159)。 

主　　题：环状RNA hsa_circ_0067582 胃癌 增殖 侵袭 AGS细胞 SGC-7901细胞 

摘      要：目的探讨hsa_circ_0067582在胃癌细胞中的表达水平及其对细胞增殖和侵袭能力的影响,并研究hsa_circ_0067582在胃癌中的作用机制。方法hsa_circ_0067582过表达(Oe-circ_0067582)质粒分别转染人胃癌AGS和SGC-7901细胞,CCK-8检测细胞活力情况,细胞克隆形成实验及EdU实验检测细胞增殖;Transwell实验检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测凋亡及上皮间质转换(EMT)相关蛋白的表达情况,并通过异种移植瘤实验观察Oe-circ_0067582对裸鼠体内SGC-7901细胞生长的影响。生物信息学方法预测hsa_circ_0067582结合的微小RNA(miRNA),并构建竞争性内源RNA(ceRNA)调控网络;对miRNA靶基因进行功能学分析。结果与pLO-ciR组相比,Oe-circ_0067582组的AGS和SGC-7901的细胞活力(t=7.883,P=0.001;t=5.679,P=0.005)、增殖(t=6.709,P=0.003;t=5.857,P=0.003)及侵袭能力(t=7.782,P=0.002;t=6.342,P=0.003)均明显降低,并诱导细胞凋亡(t=7.225,P=0.002;t=11.509,P=0.001)。Western blot结果显示,Oe-circ_0067582组的AGS和SGC-7901细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)3(t=6.863,P=0.002;t=7.024,P=0.001)、Caspase 7(t=3.295,P=0.04;t=6.008,P=0.004)、Caspase 9(t=4.408,P=0.012;t=6.278,P=0.004)和E-钙黏蛋白(t=12.453,P=0.002;t=10.867,P=0.001)蛋白表达水平均明显升高,而波形蛋白(t=7.242,P=0.002;t=5.694,P=0.004)和N-钙黏蛋白(t=6.480,P=0.003;t=7.446,P=0.001)蛋白表达水平明显降低。Oe-circ_0067582抑制SGC-7901荷瘤裸鼠体内肿瘤的生长(t=3.526,P=0.017)。根据TargetScan及miRnada数据库获知hsa_circ_0067582可竞争性地结合hsa-miR-181b-3p、hsa-miR-337-3p、hsa-miR-421和hsa-miR-548d-3p。功能富集结果表明miRNA靶基因涉及癌症相关的多个生物学过程,包括细胞凋亡负调控、基因表达、癌症中的转录失调、转化生长因子-β、p53信号通路等。结论Oe-circ_0067582抑制胃癌AGS和SGC-7901细胞增殖,并可能通过减弱EMT进程降低胃癌细胞侵袭能力,为胃癌的预防及治疗提供了新的靶点。