利用Cre-LoxP技术构建标记GABA能神经元的转基因小鼠

作     者：刘慧 李淑娇 王瑞青 蒲雪茵 李凯峰 杨雁灵 王璐 王亚云 Liu Hui;Li Shujiao;Wang Ruiqing;Pu Xueyin;Li Kaifeng;Yang Yanling;Wang Lu;Wang Yayun

作者机构：延安大学医学院人体解剖与组织胚胎学教研室延安716000 空军军医大学基础医学院基础医学教学实验中心神经系统线粒体可塑性疾病研究单元西安710032 空军军医大学第一附属医院肝胆胰脾外科西安710032 空军军医大学口腔医院军事口腔医学国家重点实验室西安710032 

出 版 物：《神经解剖学杂志》 (Chinese Journal of Neuroanatomy)

年 卷 期：2021年第37卷第6期

页      面：615-622页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071006[理学-神经生物学] 

基　　金：国家自然科学基金(81870415) 军事口腔医学国家重点实验室开放课题(2018KA01) 军事医学创新工程项目(2019ZTC03 16CXZ022) 陕西省重点研发计划(2018JZ8003) 西京医院科技助推计划(XJZT19Z29)。 

主　　题：GABA能神经元 Cre-LoxP系统 运动协调性 小鼠 

摘      要：目的:通过Cre-LoxP技术构建转基因小鼠,示踪全脑γ-氨基丁酸(GABA)能神经元分布及形态.方法:使用C57BL/6J-Gad2^(em1(IRES-iCre-pA)Smoc)小鼠(Gad2-ires-cre小鼠)与B6/JGpt-H11^(em1Cin(CAG-LoxP-ZsGreen-Stop-LoxP-tdTomato))/Gpt小鼠(B6-G/R小鼠)杂交产生Gad2^(tdTomato)/non-Gad2^(ZsGreen)子代小鼠,使用CatWalk步态分析系统分析子代小鼠完成全程时间、行走速度和协调指数的差异性;使用激光共聚焦显微镜观察小鼠全脑GABA能神经元的分布情况,并用Imaris软件对GABA能神经元进行3D重塑.结果:CatWalk步态分析结果显示,完成全程时间、行走速度和协调指数在Gad2^(tdTomato)/non-Gad2^(ZsGreen)小鼠与野生型小鼠组间无统计学差异.GABA能神经元主要分布在纹状体(ST)、嗅结节(TU)、大脑脚(CP)、黑质网状部(SNr)及小脑皮层(CbC).ST中GABA能神经元呈椭圆形,并有角状凸起;小脑浦肯野细胞(PC)树突伸入分子层,胞体排列整齐,形成浦肯野细胞层(PCL),轴突穿过颗粒细胞层(GCL),投射到小脑核(CBN).结论:Gad2^(tdTomato)/non-Gad2^(ZsGreen)小鼠运动正常,并可示踪全脑GABA能神经元的分布及形态.