西洛他唑通过Rb-p53-p21通路抑制大鼠血管平滑肌细胞体外增殖

作     者：王守力 黄明方 孙飞 殷召 陈力量 冯国斌 WANG Shou-li;HUANG Ming-fang;SUN Fei;YIN Zhao;CHEN Li-liang;FENG Guo-bin

作者机构：解放军第三0六医院心血管内科北京100101 南京军区福州总医院心内科 沈阳军区大连二一0医院心内科 总装备部武汉军事代表局驻长沙地区军事代表室 安徽医科大学附属安庆医院老年病科 北京市健宫医院心内科 

出 版 物：《中华心血管病杂志》 (Chinese Journal of Cardiology)

年 卷 期：2013年第41卷第1期

页      面：48-53页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主　　题：肌 平滑 血管 细胞增殖 西洛他唑 

摘      要：目的探讨不同浓度西洛他唑对体外培养的大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响及其可能的调控机制。方法实验分为6组，分别为DMEM阴性对照组（对照组），不同浓度西洛他唑组（共5组，分别给予1．0×10^-7、2．5×10^-7、5．0×10～、7．5×10^-7和1．0×10^-7mol／L西洛他唑干预）。细胞计数和四唑盐（MTY）比色试验分析西洛他唑对VSMC增殖能力的影响，流式细胞计数仪分析细胞周期分布，TUNEL染色检测细胞凋亡，RT-PCR和Westernblot方法分析给药前后视网膜母细胞瘤基因Rb、p53和p21基因的mRNA和蛋白表达水平的变化。结果西洛他唑可抑制血管平滑肌细胞增生，使血管平滑肌细胞阻滞于G1期，且该效应呈现明显的剂量依赖性。高浓度的西洛他唑（7．5×10^-7和1．0×10^-7mol／L）可诱导血管平滑肌细胞凋亡。西洛他唑各浓度组p53基因的mRNA和蛋白表达水平均高于对照组，其中2．5×10^-7、5．0×10^-7和7．5×10^-7mol／L组mRNA表达水平与对照组比较差异有统计学意义（P均〈0．05），1．0×10^-7mol／L组差异更为显著（3．22±0．45比1．75±0．32，P〈0．01），西洛他唑7．5×10^-7mol/L组蛋白表达水平与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05），1．0×10^-7mol／L组差异更为显著（0．53±0．11比0．18±0．06，P〈0．叭）。西洛他唑1．0×10^-7、2．5×10^-7和5．0×10^-7mol／L组p21mRNA表达水平均显著高于对照组（1．86±0．19、2．20±0．24和2．10±0．18比1．21±0．18，P均〈0．05），西洛他唑1．0×10^-7mol／L和2．5×10^-7mol／L组RbmRNA表达水平均显著高于对照组（P均〈0．05），5．0×10^-7mol／L组则更为显著（0．89±0．07比0．38±0．04，P〈0．01）。而西洛他唑7．5×10^-7和1．0×10^-7mol／L组p21的mRNA表达水平则显著低于对照组（0．81±0．09比1．21±0．18，P〈0．05和0．36±0．10比1．21±0．18，P〈0．01），RbmRNA的表达水平亦均显著低于对照组（0．12±0．02和0．11±0．02比0．38±0．04，P均〈0．01）。随着西洛他唑浓度的增加，p21和Rb基因的蛋白表达水平亦呈现先升高后下降的态势。结论西洛他唑可显著抑制体外培养的大鼠VSMC增殖，机制可能为通过Rb—p53-p21通路抑制VSMC增殖，并通过p53基因过表达诱导VSMC凋亡。