非增殖型腺病毒和肿瘤特异性增殖型腺病毒携带IL-12基因治疗肝癌的体外实验研究

作     者：王星华 杨甲梅 崔贞福 王伟国 吴孟超 钱其军 WANG Xing hua;YANG Jia mei;CUI Zhen fu;WANG Wei guo;WU Meng chao;QIAN Qi jun.

作者机构：第二军医大学东方肝胆外科医院病毒和基因治疗中心 

出 版 物：《中华肿瘤杂志》 (Chinese Journal of Oncology)

年 卷 期：2004年第26卷第10期

页      面：581-584页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家863高技术研究发展计划基金重点资助项目(2001AA217031) 国家自然科学基金国际合作项目(30120160824) 

主　　题：增殖型腺病毒 IL-12基因 B细胞 感染 肿瘤 治疗 HepG2 目的基因 蛋白质印迹 表达量 

摘      要：目的比较携带小鼠IL12基因的增殖型腺病毒(CNHK200mIL12)和非增殖型腺病毒(AdvmIL12)对IL12基因的表达以及对肝癌细胞的杀伤能力。方法通过MTT以及病毒增殖实验,评估E1B55000缺陷的增殖型腺病毒CNHK200mIL12和ONYX015(dl1520),以及非增殖型腺病毒AdvmIL12对人正常肝细胞株LO2、人肝癌细胞株HepG2和Hep3B的杀伤能力。采用蛋白质印迹分析和ELISA法,检测CNHK200mIL12和AdvmIL12感染HepG2和Hep3B细胞后,小鼠IL12基因的表达情况。结果CNHK200mIL12感染HepG2和Hep3B细胞后大量增殖,在感染后96h时检测,分别增殖3160倍和630倍,在极低的MOI(空斑形成单位/细胞)值和极短的时间内(HepG2细胞MOI=0.2,第4天;Hep3B细胞MOI=0.005,第2天),可大量杀伤肿瘤细胞,而对LO2细胞无明显杀伤。CNHK200mIL12和AdvmIL12感染HepG2细胞后,其IL12基因表达量,前者是后者的101倍;感染Hep3B细胞后,前者是后者的20倍。结论增殖型腺病毒载体对肿瘤细胞的杀伤能力和目的基因的表达,明显优于传统的非增殖型腺病毒载体,应用前景广阔。