玉米黄烷酮-3-羟化酶原核表达条件对香橙素生成量的影响

作     者：黄旭 王振 刘娟 肖妃垚 田苗苗 郭佳婧 单杨 HUANG Xu;WANG Zhen;LIU Juan;XIAO Feiyao;TIAN Miaomiao;GUO Jiajing;SHAN Yang

作者机构：湖南大学隆平分院湖南长沙410082 湖南省农业科学院农产品加工研究所/果蔬贮藏加工与质量安全湖南省重点实验室/湖南省果蔬加工与质量安全国际科技创新合作基地湖南长沙410125 

出 版 物：《食品与发酵工业》 (Food and Fermentation Industries)

年 卷 期：2022年第48卷第3期

页      面：38-43页

核心收录：

学科分类：0832[工学-食品科学与工程（可授工学、农学学位）] 08[工学] 083201[工学-食品科学] 

基　　金：湖南省科技厅重点领域研发技术项目(2019NK2041) 湖南省农业科技创新资金重点项目(2020CX47) 

主　　题：香橙素 黄烷酮-3-羟化酶 原核表达 表达条件优化 

摘      要：香橙素是类黄酮代谢途径中重要的中间化合物,黄烷酮-3-羟化酶(flavanone-3-hydroxylase,F3H)能以柚皮素为底物催化C;位接羟基从而生成香橙素。为实现香橙素绿色发展,该研究利用微生物法,对来自玉米的Zmf3h构建大肠杆菌原核表达系统后诱导ZmF3H蛋白表达。通过发酵实验验证ZmF3H在胞内可溶性表达并成功催化生成香橙素。为提高香橙素产量,对蛋白表达阶段的菌体密度、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)诱导剂浓度、诱导时间和诱导温度等条件进行优化实验。单因素试验结果表明各实验组分别在菌种密度OD;=0.8~1.0,IPTG终浓度为0.6 mmol/L,诱导温度在23℃,诱导8 h时可明显提高香橙素生成量,综合各单因素优化条件进行实验验证后发现香橙素生成量为(32.27±1.98)mg/L,与初始条件相比提高了60.39%。