Survivin、TGFβ3与TIMP-1慢病毒载体的构建及其人髄核细胞表达

作     者：郭柱 岳斌 马学晓 胡有谷 杨堃 陈伯华 GUO Zhu;YUE Bin;MA Xuexiao;HU Yougu;YANG Kun;CHEN Bohua

作者机构：青岛大学医学院附属医院脊柱外科山东青岛266003 

出 版 物：《青岛大学医学院学报》 (Acta Academiae Medicinae Qingdao Universitatis)

年 卷 期：2014年第50卷第5期

页      面：380-382页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

基　　金：国家自然基金资助项目(81171758) 

主　　题：凋亡抑制蛋白质类 转化生长因子β3 金属蛋白酶1组织抑制剂 慢病毒属 椎间盘 退变 

摘      要：目的构建人生存素（Survivin）、转化生长因子03（TGFtβ3）与基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）三基因过表达慢病毒载体，通过一次转染，实现Survivin、TGFβ3、TIMP-1三基因在人退变椎间盘髓核细胞的稳定转染，为逆转或延缓椎间盘退变的基因治疗提供实验基础。方法应用Survivin、TGFβ3、TIMP-1慢病毒载体联合转染人退变髓核细胞，应用Real—TimePCR技术检测转染后基因表达情况。结果人退变椎间盘髓核细胞在转染后1周，Survivin、TGFβ3、TIMP-1三基因在基因水平均获得稳定过表达，并且其表达能维持细胞传至第3代或更久。Real—TimePCR检测结果显示，目的病毒组Survivin、TGFβ3、TIMP-1均过表达，其相对表达量与空白组比较，差异有显著性（F=12．96～3889．70，P〈O．05）。结论Survivin、TGFβ3与TIMP-1慢病毒载体能够稳定转染人退变椎间盘髓核细胞，并且能长时间维持其表达，从而发挥生物学效应。