多重PCR结合毛细管电泳检测儿童呼吸道病原体方法的建立及应用

作     者：马菁菁 陶桂香 陈倩 

作者机构：南京医科大学附属儿童医院儿科研究所江苏南京210029 南京医科大学儿科学院江苏南京210029 

出 版 物：《南京医科大学学报（自然科学版）》 (Journal of Nanjing Medical University(Natural Sciences))

年 卷 期：2022年第42卷第1期

页      面：133-136页

学科分类：1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 10[医学] 

基　　金：南京市医学科技发展课题(YKK17161) 南京医科大学科技发展基金(NMUB2019201) 

主　　题：儿童 呼吸道病原体 多重PCR 毛细管电泳 

摘      要：目的:建立肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,***)、肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KP)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,***)、阴沟杆菌(Enterobacter cloacae,Ecl)、白色假丝酵母菌(Candida albicans,Cal)、鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,Aba)7种儿童呼吸道病原体多重PCR结合毛细管电泳法检测体系。方法:随机收集南京市儿童医院2020年11—12月266例儿童呼吸道病原体样本,针对MP、***、KP、***、Ecl、Cal、Aba保守序列设计特异性引物,设计并优化多重PCR结合毛细管电泳检测体系;将该检测结果与细菌培养以及荧光定量PCR比对,评估该方法的检测性能(灵敏度、特异度)。结果:所设计引物可以特异性扩增出呼吸道病原体;多重PCR结合毛细管电泳检测体系检出敏感性高;与其他呼吸道感染病原体未出现交叉反应,无明显的非特异峰,特异性较好。结论:成功建立一种能够快速筛查7种常见儿童呼吸道病原体的多重PCR结合毛细管电泳的检测方法。