双酶显色-紫外-可见分光光度法测定牛奶中组胺与腐胺的含量

作     者：姚晓曈 徐斐 叶泰 袁敏 刘振民 喻东威 YAO Xiaotong;XU Fei;YE Tai;YUAN Min;LIU Zhenmin;YU Dongwei

作者机构：上海理工大学医疗器械与食品学院上海食品快速检测工程技术研究中心上海200093 光明乳业股份有限公司乳业研究院上海200436 内蒙古蒙牛乳业集团股份有限公司呼和浩特011500 

出 版 物：《理化检验（化学分册）》 (Physical Testing and Chemical Analysis(Part B:Chemical Analysis))

年 卷 期：2022年第58卷第1期

页      面：40-44页

学科分类：081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 070302[理学-分析化学] 0703[理学-化学] 

基　　金：十三五国家重点研发计划(2018YFC1604202) 上海市科委农业重点科技攻关项目(17391901500,18391901200) 

主　　题：二胺氧化酶 辣根过氧化物酶 紫外-可见分光光度法 组胺 腐胺 牛奶 

摘      要：建立了基于二胺氧化酶-辣根过氧化物酶双酶显色的紫外-可见分光光度法测定牛奶中组胺与腐胺含量的方法。取10mL牛奶样品,加入10mL 2%(质量分数)硝酸铅标准溶液,混匀,再加入20mL 0.1%(质量分数)三氯乙酸标准溶液,混匀,离心,取上清液,将溶液pH调至7.2,得到待测样品溶液。移取1.0g·L^(-1)二胺氧化酶标准溶液100μL,加入100μL待测样品溶液,于50℃水浴中反应15min。反应结束后,依次加入1.0g·L^(-1)辣根过氧化物酶标准溶液50μL,0.5g·L^(-1)四甲基联苯胺标准溶液200μL和2mol·L^(-1)盐酸溶液50μL,采用紫外-可见分光光度计测定体系的吸光度。结果显示:样品溶液由无色变为蓝色又变为黄色;组胺、腐胺的浓度分别在2.5~150μmol·L^(-1)和5~200μmol·L^(-1)内与其对应的吸光度呈线性关系,检出限(3S/N)分别为0.6522μmol·L^(-1)和1.1341μmol·L^(-1)。对空白牛奶样品进行加标回收试验,组胺和腐胺的回收率分别为80.5%~88.3%和89.5%~92.3%,测定值的相对标准偏差(RSD,n=5)分别为2.5%~4.4%和4.4%~5.1%。