应用聚合酶链反应及免疫印迹法直接从流行性出血热…

作     者：杨佩珍 陈国芬 Yang Peizhen;Chen Guefen;Wang Jiarui

作者机构：200040 

出 版 物：《中华实验和临床病毒学杂志》 (Chinese Journal of Experimental and Clinical Virology)

年 卷 期：1993年第7卷第2期

页      面：170-173页

核心收录：

学科分类：1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 100401[医学-流行病与卫生统计学] 10[医学] 

主　　题：免疫印迹法 流行性出血热 聚合酶链反应 

摘      要：用聚乙二醇（PEG）沉淀流行性出血热（EHF）病人血清循环免疫复合物（CIC），然后通过葡萄球菌A-琼脂糖凝脱柱（SBA）进一步纯化CIC，用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺电泳（SDS-PAGE）及免疫印迹法（Western blot）检测CIC中EHF病毒的特异性多肽成分。此外，对纯化的CIC应用聚合酶链反应（PCR）方法从分子水平证实其特异性。将PCR产物作DNA琼脂凝胶电泳，从DNA区带位置证实其为EHF病毒特异性DNA．然后作Southern blot，采用DNA杂交自显影法进一步证实特异性。应用上述方法首先从人工合成复合物经纯化后，检测病毒抗原。继之，从76份EHF病人血标本纯化CIC后，直接从CIC中检测EHF病毒抗原。