活化的Mir-30a-wnt/β-catenin信号轴通过上调组织蛋白酶K的表达促进牙周膜干细胞向成牙骨质细胞分化

作     者：刘芬 周志斐 薛洋 朱斌 吴补领 陈发明 LIU Fen;ZHOU Zhifei;XUE Yang;ZHU Bin;WU Buling;CHEN Faming

作者机构：西北妇女儿童医院口腔科陕西西安710000 第四军医大学口腔医院牙周病科陕西西安710000 南方医科大学深圳医院颌面外科广东深圳518000 西藏军区总医院口腔科西藏拉萨850000 第四军医大学口腔医院颌面外科陕西西安710000 南方医科大学深圳口腔医院(坪山)广东深圳518000 

出 版 物：《南方医科大学学报》 (Journal of Southern Medical University)

年 卷 期：2021年第41卷第10期

页      面：1439-1447页

核心收录：

学科分类：1003[医学-口腔医学] 100302[医学-口腔临床医学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81530050) 陕西省重点研发计划一般项目(2020SF-047) 陕西省青年科技新星项目(2021KJXX-24) 西藏自治区重点研发计划项目(XZ202001ZY0059G)。 

主　　题：牙周膜干细胞 组织蛋白酶K 成牙骨质向分化 微小RNA wnt信号通路 

摘      要：目的探讨牙周膜干细胞(PDLSC)成牙骨质向分化过程中mir-30a-wnt/β-catenin信号轴调控组织蛋白酶K(CTSK)表达的功能作用。方法极限稀释法分离培养PDLSC,釉基质蛋白衍生物(EMD)诱导细胞成牙骨质向分化。在细胞分化过程中,通过microRNA芯片筛选差异表达的microRNA。首先,给予不同分组细胞EMD诱导和/或抑制microRNA表达等处理,无干预组细胞作为对照。利用qPCR和Western blot技术首先验证差异表达的microRNA是否能够调控CTSK的表达。之后,将细胞膜片复合陶瓷支架材料植入裸鼠皮下,利用免疫组织化学方法观察成牙骨质细胞标记蛋白CAP和CEMP-1的表达变化,明确受microRNA调控的CTSK表达变化是否参与了PDLSC成牙骨质分化。在此基础上,从蛋白学水平观察wnt信号通路在microRNA调节CTSK表达过程中是否发挥了相应功效。结果EMD诱导PDLSC成牙骨质向分化过程中,多种microRNA表达发生变化,其中miR-30a表达出现特异性上调(P0.05)。表达上调的miR-30a进一步调节CTSK的表达(P0.05),促进PDLSC异位形成类牙骨质样结构,高表达成牙骨质细胞标记蛋白CAP和CEMP-1。抑制wnt/β-catenin信号通路,miR-30a对CTSK的表达调控作用出现相应减弱。结论EMD可能通过上调miR-30a的表达激活wnt/β-catenin信号通路从而经mir-30a-wnt/β-catenin信号轴调控CTSK诱导PDLSC向成牙骨质细胞方向分化。