顺铂对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体逆转胃癌多药耐药现象的增敏作用及机制

作     者：朱邢超 张开光 王巧民 陈思 苟雅雯 崔喻芳 李琴 Zhu Xingchao;Zhang Kaiguang;Wang Qiaomin;Chen Si;Gou Yawen;Cui Yufang;Li Qin

作者机构：安徽医科大学附属省立医院消化内科合肥230001 

出 版 物：《中华肿瘤杂志》 (Chinese Journal of Oncology)

年 卷 期：2015年第37卷第6期

页      面：404-411页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：安徽省自然科学基金(1308085MH167) 

主　　题：胃肿瘤 顺铂 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 多药耐药相关蛋白质类 抗药性,肿瘤 细胞系 

摘      要：目的：研究顺铂（DDP）对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）逆转人胃腺癌耐长春新碱（ VCR） SGC7901-VCR细胞多药耐药现象的增敏作用，以及可能的分子机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝（ MTT）法检测不同化疗药物处理组SGC7901和SGC7901-VCR细胞的半数抑制浓度（ IC50）和细胞存活率。以不同浓度的DDP和TRAIL单独或联合处理SGC7901-VCR细胞，采用逆转录PCR、荧光定量PCR和Western blot法检测不同处理组中多种基因的mRNA和蛋白表达。以c-myc-siRNA干扰、重组c-myc质粒转染SGC7901-VCR细胞，采用逆转录PCR和Western blot法检测不同处理组SGC7901-VCR细胞中死亡受体（ DR）4、DR5、c-myc基因的mRNA和蛋白表达。结果与单用TRAIL组和空白对照组比较，联合DDP后，VCR、DDP、阿霉素和氟尿嘧啶对SGC7901-VCR细胞的IC50均明显降低（均P0．05）。 TRAIL联合DDP时，对SGC7901-VCR细胞中caspase-3的激活作用以及对DNA-PKcs／Akt／GSK-3β信号通路、耐药基因MDR1、MRP1的抑制程度明显高于TRAIL单独作用时（均P0．01）。以siRNA干扰沉默c-myc后，SGC7901-VCR细胞中c-myc、DR4和DR5的表达明显减低（均P0．01）；以重组 c-myc质粒转染高表达 c-myc后，SGC7901-VCR细胞中 c-myc、DR4和DR5的表达明显增加（均P0．01）。10 ng／ml TRAIL组、0．25μg／ml DDP＋10 ng／ml TRAIL组和0．5μg／ml DDP＋10 ng／ml TRAIL组c-myc蛋白的相对表达量分别为0．314±0．012、0．735±0．026和0．876±0．028，细胞色素C（cyt C）蛋白的相对表达量分别为0．339±0．036、0．593±0．020和0．735±0．031，差异有统计学意义（P0．05）；DR4、DR5、活性caspase-9和活性caspase-3蛋白的相对表达量也随着DDP 浓度的增加而增加。结论 SGC7901-VCR的多药耐药性与DNA-PKcs／Akt／GSK-3β信号通路的激活以及耐药基因MDR1和MRP1的高表达有关。与TRAIL 联合时，DDP能够通过增加c-myc的表达促进DR4和DR5的高表达，并促进线粒体释放cyt C进一步激活TRAIL通路的caspase阶梯反应，来增强TRAIL对SGC7901-VCR细胞多药耐药特性的逆转作用。