A型塞尼卡病毒与O型、A型、亚洲I型口蹄疫病毒多重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用

作     者：施开创 谢守玉 赵晶 莫胜兰 刘惠心 尹彦文 司红彬 屈素洁 陆文俊 冯淑萍 粟艳琼 

作者机构：广西动物疫病预防控制中心 广西大学动物科学技术学院 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2021年

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：广西科技重大专项（桂科AA17204057） 广西水产畜牧科技项目（桂渔牧科201528017） 广西农业科技项目（Z201954) 

主　　题：A型塞尼卡病毒 口蹄疫病毒 荧光定量RT-PCR 检测方法 

摘      要：为建立鉴别检测A型塞尼卡病毒（SVA）与O型、A型、亚洲I型口蹄疫病毒（FMDV）的方法，针对SVA 3D基因与O型、A型、亚洲I型FMDV VP1基因，分别设计特异性引物和TaqMan探针，经优化反应条件，建立了同时检测SVA与O型、A型、亚洲I型FMDV的TaqMan荧光定量RT-PCR方法。所建立的方法能特异性扩增SVA及O型、A型、亚洲I型FMDV，与其他主要猪源病毒无交叉反应；对SVA与O型、A型、亚洲I型FMDV质粒标准品的检出下限分别为2.50×10;、2.50×10;、2.50×10;、2.50×10;拷贝/μL；组内与组间重复性试验的变异系数均小于2%。应用所建立方法检测2019年来自广西的30份临床疑似样品，SVA和O型FMDV的检出阳性率分别为20%和70%，而未能检出A型和亚洲I型FMDV。表明，本研究所建立的多重荧光定量RT-PCR方法为SVA与O型、A型、亚洲I型FMDV的临床检测和流行病学调查提供了特异、敏感、高效的技术手段。