HOXC10基因对体外人牙髓干细胞增殖和成脂分化的调控作用机制研究

作     者：尹霜霜 李隽 Yin Shuangshuang;Li Jun

作者机构：湖南中医药高等专科学校附属第一医院口腔科株洲412000 

出 版 物：《广西医科大学学报》 (Journal of Guangxi Medical University)

年 卷 期：2021年第38卷第9期

页      面：1698-1703页

学科分类：1003[医学-口腔医学] 100301[医学-口腔基础医学] 10[医学] 

基　　金：湖南省卫生计生委2017年度科研计划课题项目(No.B201704) 

主　　题：HOXC10 人牙髓干细胞 增殖 成脂分化 WNT通路 

摘      要：目的:探讨HOXC10基因对体外人牙髓干细胞增殖和成脂分化的调控作用及其分子机制。方法:原代分离培养人牙髓干细胞,分别将si-HOXC10、si-con转染至人牙髓干细胞,分别记作si-HOXC10组、si-con组,未经转染的人牙髓干细胞记作NC组,同时将人牙髓干细胞进行成脂诱导。q PCR与Western blotting分别检测HOXC10 mRNA及蛋白表达量;采用Western blotting检测成脂诱导后细胞中过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPARγ)、重组人CCAAT增强子结合蛋白-α(C/EBP-α)蛋白水平。甲基噻唑基四唑(MTT)检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移能力;采用酶标仪检测细胞的黏附能力;Western blotting检测沉默HOXC10对PPARγ、C/EBP-α、WNT通路相关蛋白糖原合成酶激酶-3(GSK3β)、β-连环蛋白(β-catenin)表达的影响。结果:与培养前相比,成脂分化诱导后人牙髓干细胞中HOXC10 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P0.05),PPARγ、C/EBP-α的表达水平显著降低(P0.05);与si-con组相比,si-HOXC10组人牙髓干细胞活性显著降低(P0.05);相较于si-con组,si-HOXC10组人牙髓干细胞迁移细胞数显著增多(P0.05),细胞黏附能力显著升高(P0.05);与si-con组相比,siHOXC10组人牙髓干细胞中PPARγ、C/EBP-α的表达水平显著降低(P0.05);与si-con组相比,si-HOXC10组人牙髓干细胞WNT通路中GSK3β蛋白水平显著降低(P0.05),β-catenin蛋白水平显著升高(P0.05)。结论:沉默HOXC10基因可抑制人牙髓干细胞增殖及成脂分化,其作用机制可能是通过激活WNT通路而发挥作用。