幽门螺杆菌HspA-UreB融合蛋白包涵体的纯化及活性鉴定

作     者：纪晋文 代丽萍 段广才 郗园林 JI Jin-wen;DAI Li-ping;DUAN Guang-cai;XI Yuan-lin

作者机构：郑州大学公共卫生学院流行病学教研室河南郑州450052 

出 版 物：《吉林大学学报（医学版）》 (Journal of Jilin University：Medicine Edition)

年 卷 期：2005年第31卷第2期

页      面：256-258页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：河南省医学科技创新人才工程项目资助课题 (2 0 0 0 - 84 ) 河南省科技攻关项目资助课题 (0 4 2 4 4 10 0 35 ) 

主　　题：螺杆菌 幽门 热休克蛋白质类 尿素酶 重组融合蛋白质类 包涵体 蛋白质类/分离和提化 

摘      要：目的 :建立一种有效的纯化幽门螺杆菌热休克蛋白 A亚单位 -尿素酶 B亚单位 (Hsp A- Ure B)融合蛋白包涵体的方法。方法 :基因工程重组大肠杆菌 BL2 1(p ET- HU2 7)诱导表达的 Hsp A- Ure B融合蛋白包涵体经洗涤、变性、复性 ,在 A¨ KTA FPL C上运用 Hi Trap Chelating HP分离纯化 ,用 SDS- PAGE和 Bradford法检测目的蛋白的纯度和含量 ,用 Western blotting对纯化后蛋白进行免疫学活性鉴定。结果 :纯化后 Hsp A- Ure B融合蛋白的纯度 90 % ,含量达 0 .2 5 g· L- 1 ,并可以被 Hsp A- U re B融合蛋白免疫小鼠血清识别。结论 :成功地建立了从包涵体中纯化高纯度 Hsp A- U re B融合蛋白的方法。