MicroRNA-9通过SIRT1/NF-κB通路促进TNF-α诱导心肌细胞损伤的机制研究

作     者：张朝华 刘旭帮 朱银川 汤建民 Zhang Chaohua;Liu Xubang;Zhu Yinchuan;Tang Jianmin

作者机构：郑州人民医院心血管内科郑州450000 郑州大学第二附属医院心血管内科郑州450003 

出 版 物：《中国循证心血管医学杂志》 (Chinese Journal of Evidence-Based Cardiovascular Medicine)

年 卷 期：2021年第13卷第7期

页      面：803-806页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：河南省2018年度科技攻关计划项目(182102310166) 

主　　题：microRNA-9 心肌细胞 细胞活性 肿瘤坏死因子α 

摘      要：目的研究microRNA-9(miR-9)表达对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导心肌细胞(H9c2)损伤的影响,并探讨其分子机制。方法使用CCK8试剂盒检测不同浓度(0、5、10、15和20μg/mL)TNF-α刺激H9c2或TNF-α作用于H9c2不同时间(0、12、24、48和72 h)后心肌细胞活性;向H9c2细胞中转染miR-9抑制剂(miR-9-inhibitor)以敲低miR-9的表达,通过实时荧光定量PCR法检测miR-9的表达,通过免疫印迹法检测SIRT1、p65及p-p65蛋白表达;荧光素酶基因报告系统用于检测miR-9与SIRT1靶向结合情况。结果 TNF-α以剂量和时间依赖性降低心肌细胞活性和促进miR-9在心肌细胞中的表达。与miR-9未敲低组相比,TNF-α刺激后,miR-9敲低组H9c2细胞活性更高(P0.05)。荧光素酶基因报告结果显示:miR-9靶向抑制SIRT1的表达,miR-9敲低可显著促进H9c2细胞中SIRT1蛋白的表达,显著降低p-p65/p65的比例(P均0.05)。结论 miR-9通过抑制SIRT1促进NF-κB通路激活。敲低miR-9可抑制NF-κB通路激活从而减轻TNF-α诱导的心肌细胞损伤,提高心肌细胞活性。