鹅源星状病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

作     者：苏世博 蒲路莎 陈肖韩 赵丽丽 陈洪岩 SU Shibo;PU Lusha;CHEN Xiaohan;ZHAO Lili;CHEN Hongyan

作者机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/兽医生物技术国家重点实验室/黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室/国家禽类实验动物资源库哈尔滨150069 

出 版 物：《中国比较医学杂志》 (Chinese Journal of Comparative Medicine)

年 卷 期：2021年第31卷第3期

页      面：43-48页

学科分类：10[医学] 

基　　金：国家十三五重点研发计划子课题(2016YFD0500800) 黑龙江省青年科学基金项目(QC2018033) 黑龙江省自然科学基金重点项目(ZD2016006) 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(1610302020008,1610302017013) 

主　　题：鹅源星状病毒 荧光定量PCR 雏鹅痛风 检测方法 

摘      要：目的建立一种可快速诊断鹅源星状病毒的荧光定量PCR方法。方法分析比对NCBI下载的鹅源星状病毒全基因组序列,在其ORF1a保守区设计一对特异性引物及Taq Man探针,优化反应条件,建立标准曲线,并验证其特异性,敏感性和稳定性。结果该方法最低检测线限为1.50×10^(2)copies/μL,批内和批间检测变异系数分别小于0.5%和4%,且对其他常见水禽病毒无特异性扩增。临床应用结果显示检出率明显高于常规RT-PCR方法。结论建立了一种鹅源星状病毒的Taq Man荧光定量PCR方法,该方法特异性强,灵敏度高且重复性良好,适用于鹅源星状病毒的早期检测和定量分析。