LncRNA ZBED3-AS1/miR-339-5p/Notch 1轴调控骨质疏松大鼠成骨细胞增殖分化

作     者：仲艳 陆关珍 姬亚锋 王雍立 马志红 史玲美 Zhong Yan;Lu Guanzhen;Ji Yafeng;Wang Yongli;Ma Zhihong;Shi Lingmei

作者机构：湖州市中心医院外科313000 湖州市中心医院骨外科313000 湖州市中心医院精准医学临床研究中心313000 

出 版 物：《中华内分泌外科杂志》 (Chinese Journal of Endocrine Surgery)

年 卷 期：2021年第15卷第1期

页      面：78-84页

学科分类：1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 100214[医学-肿瘤学] 0703[理学-化学] 10[医学] 0702[理学-物理学] 1009[医学-特种医学] 

基　　金：浙江省医药卫生学科平台项目(2018ZD045) 浙江省医药卫生科技计划项目(2020KY936) 湖州市公益性研究项目(2018GYB42)。 

主　　题：ZBED3-AS1 miR-339-5p 骨质疏松 成骨细胞 增殖 分化 

摘      要：目的探究LncRNA ZBED3-AS1调控miR-339-5p/Notch 1在骨质疏松大鼠成骨细胞增殖分化中的作用。方法构建假手术(Sham)组和模型(Model)组大鼠模型,对大鼠的骨密度进行检查观测大鼠建模情况。分离大鼠成骨细胞,qRT-PCR检测细胞中ZBED3-AS1、miR-339-5p的表达。对Sham组和Model组大鼠成骨细胞进行分组后转染。CCK8、茜素红(AR-S)染色、碱性磷酸酶(ALP)染色检测各组细胞增殖分化能力。FISH实验测定ZBED3-AS1在细胞中的分布。双荧光素酶报告证实ZBED3-AS1与miR-339-5p及miR-339-5p和Notch 1之间的关系。Western blot检测Notch通路相关因子的表达。结果检测股骨骨密度发现,Model组大鼠骨密度明显低于Sham组大鼠(P=0.0 057)。与Sham组大鼠比较,Model组大鼠成骨细胞中ZBED3-AS1呈低表达,而miR-339-5p呈高表达(均P0.05)。过表达ZBED3-AS1能促进成骨细胞的增殖分化;而敲减ZBED3-AS1则能抑制成骨细胞增殖分化(均P0.05)。ZBED3-AS1作为ceRNA调控miR-339-5p(均P0.05)。过表达miR-339-5p能抑制成骨细胞的增殖分化能力,而该作用可被ZBED3-AS1过表达部分挽救。Notch 1被证实为miR-339-5p的作用靶点,且干预ZBED3-AS1/miR-339-5p的表达能影响Notch 1的蛋白表达,ZBED3-AS1/miR-339-5p对成骨细胞的调控可能是通过Notch通路实现的。结论 ZBED3-AS1能作为ceRNA调控miR-339-5p,进而影响骨质疏松大鼠成骨细胞增殖分化。