miR-203a通过靶向抑制CDK6调控膀胱癌细胞增殖及放射敏感性

作     者：王磊 乔庆东 黄海航 李浩然 何云峰 Wang Lei;Qiao Qingdong;Huang Haihang;Li Haoran;He Yunfeng

作者机构：新乡市中心医院泌尿外一科453000 新乡市中心医院放疗科453000 新乡医学院基础医学院453000 重庆医科大学附属第一医院泌尿外科400016 

出 版 物：《中华放射肿瘤学杂志》 (Chinese Journal of Radiation Oncology)

年 卷 期：2021年第30卷第2期

页      面：191-197页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：河南省科技发展计划项目(172102310371) 河南省医学科技攻关计划联合共建项目(2018020928) 

主　　题：miR-203a 细胞周期蛋白依赖性激酶 放射敏感性 膀胱癌细胞系 

摘      要：目的探讨miR-203a在膀胱癌(BC)细胞系(RT-112、T24、5637、UM-UC-3细胞)中的表达及对细胞增殖及放射敏感性的影响。方法将miR-203a mimics、miR-203a inhibitor、CDK6siRNA、CDK6表达质粒及相应阴性对照(NC)转染入BC细胞中。实时荧光定量PCR检测miR-203a在RT-112、T24、5637、UM-UC-3细胞和人膀胱上皮永生化细胞系(SV-HUC-1)中的表达。CCK8实验研究miR-203a和CDK6对BC细胞系增殖的调控。克隆形成实验研究miR-203a和CDK6对BC细胞系放射敏感性的影响。荧光素酶报告基因实验验证miR-203a的靶基因。蛋白印迹法检测miR-203a对CDK6蛋白表达的影响。采用单因素方差分析进行多组间比较、t检验进行两组间比较。结果与SV-HUC-1细胞相比,miR-203a在RT-112、T24、5637、UM-UC-3细胞中的表达明显降低(P0.05)。与NC相比,过表达miR-203a抑制BC细胞系增殖(P0.05),敲低miR-203a促进BC细胞系增殖(P0.05)。与NC相比,过表达miR-203a增加BC细胞系的放射敏感性(P0.05),敲低miR-203a减弱BC细胞系的放射敏感性(P0.05)。CDK6是miR-203a的作用靶点。与NC组相比,过表达miR-203a显著降低了CDK6蛋白水平(P0.05),敲低miR-203a显著上调了CDK6蛋白水平(P0.05)。在转染miR-203a mimics的T24和UM-UC-3细胞中过表达CDK6后,与miR-203a mimics组相比,细胞增殖能力升高、放射敏感性降低(P0.05);在转染miR-203a inhibitor的RT-112和5637细胞中沉默CDK6后,与miR-203a inhibitor组相比,细胞增殖能力降低、放射敏感性升高(P0.05)。结论miR-203a在BC细胞系中低表达,可作为抑癌基因抑制BC细胞系增殖和增强放射敏感性。