发根农杆菌介导的虎杖转基因体系优化

作     者：段梦灵 李鲁汉 廖辉 陈新月 马钰玺 林艳丽 柳忠玉 吴晓倩 潘佑找 伍翔 DUAN Mengling;LI Luhan;LIAO Hui;CHEN Xinyue;MA Yuxi;LIN Yanli;LIU Zhongyu;WU Xiaoqian;PAN Youzhao;WU Xiang

作者机构：长江大学生命科学学院湖北荆州434025 长江大学园艺园林学院湖北荆州434025 

出 版 物：《现代农业科技》 (Modern Agricultural Science and Technology)

年 卷 期：2021年第4期

页      面：46-50页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目“虎杖中一个新的MYB转录因子在白藜芦醇合成中的功能研究”(81803670) 湖北省大学生创新训练计划项目“虎杖PcMYB1反义植物表达载体构建及对虎杖毛状根的转化”(省级S202010489075 校级2019279) 长江大学大学生创新训练计划项目“虎杖转录因子PcMYB2功能初步探究”(Yz2020265) 

主　　题：虎杖 发根农杆菌 毛状根 转基因 

摘      要：为建立虎杖高效遗传转化体系,用携带有植物表达载体pCAMBIA1301的发根农杆菌ATCC15834侵染虎杖无菌苗获得毛状根。对影响虎杖毛状根诱导的因素(如外植体种类、农杆菌活力、培养基种类、超声波辅助时间)进行优化,以获得最佳培养条件;通过潮霉素筛选阳性毛状根,以确定最佳潮霉素浓度。结果表明:以叶片为外植体、1/2MS为培养基、菌液OD600=0.8、超声波辅助5 s时,虎杖遗传转化毛状根效果最佳;筛选出的毛状根经GUS染色和PCR分子鉴定,该方法的阳性转化率为92%。该研究优化了虎杖毛状根的培养条件,为后期试验探究建立了更加高效的虎杖转基因体系。